。ㄈ)惡性淋巴瘤的免疫細(xì)胞分型
淋巴瘤分型對(duì)病人預(yù)后的估計(jì),臨床治療有指導(dǎo)性意義。但這不如良惡性鑒別重要。在日常外檢中進(jìn)行淋巴瘤分型,應(yīng)挑選針對(duì)性強(qiáng)、特異性高、使用方便的標(biāo)記抗體。如有條件的單位以新鮮組織冰凍切片標(biāo)記、陽(yáng)性率高。一般單位病理科則選用石蠟切片標(biāo)記抗體。目前比較常用而效果穩(wěn)定的石蠟切片標(biāo)記抗體有L26(全B,除漿細(xì)胞瘤)UCL1(全T )KP1或Mac387組織細(xì)胞標(biāo)記。T淋巴瘤應(yīng)用CD4與CD8標(biāo)記區(qū)別輔助T或抑制T。
以上為NHL標(biāo)記分型。關(guān)于HD的R-S細(xì)胞標(biāo)記。R—s 細(xì)胞的發(fā)生組織細(xì)胞至今尚未完全肯定、R—S細(xì)胞標(biāo)記抗體最先應(yīng)用LeuM1(CD15)抗體,它對(duì)HD—LPL—H型R—S細(xì)胞不標(biāo)記。且對(duì)粒細(xì)胞、T細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞,甚至上皮細(xì)胞也陽(yáng)性。最近由體外培養(yǎng)的R—S細(xì)胞提取抗原制成的Ki-1McAb、對(duì)所有類型的R—S細(xì)胞均為陽(yáng)性表達(dá)。但對(duì)活化的T或B淋巴細(xì)胞亦陽(yáng)性。且需作冰凍切片染色。而可在石蠟切片表達(dá)的Ber—H2抗體問(wèn)世,就解決了困難問(wèn)題。
。ㄋ)在惡性淋巴瘤免疫表型分析中的注意事項(xiàng)
為了正確應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)標(biāo)記手段在惡性淋巴瘤診斷,分型等方面發(fā)揮更大的作用應(yīng)注意下列問(wèn)題:①免疫細(xì)胞化學(xué)在惡性淋巴瘤分析中應(yīng)緊密結(jié)合組織學(xué)改變,有目的地選用高效、廣譜的抗體,淋巴瘤常用標(biāo)記抗體見(jiàn)表12-4。因?yàn)槊庖呒?xì)胞化學(xué)的結(jié)果受到多種因素的影響,可以出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性;②為了避免因抗體標(biāo)記的局限性而造成漏診,有條件的單位最好一次用同功能的幾種抗體,這樣可以起來(lái)抗體間的反應(yīng)互補(bǔ)性,往往比單項(xiàng)抗體的標(biāo)記率高;③標(biāo)本固定要及時(shí),應(yīng)用中性福爾馬林液或B5固定液,則抗原保存要好一些。盡可能應(yīng)用低壓,低溫(60℃以下)浸蠟,減少抗原的破壞丟失;④抗體的濃度要適當(dāng),消除背景染色。加用二甲砷酸鈉可除去背景著色。特別膜標(biāo)記陽(yáng)性時(shí)與背景著色很難區(qū)分。前者包繞細(xì)胞呈環(huán)狀;⑤每次染色應(yīng)有陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照;⑥目前淋巴瘤的基因重排檢測(cè)技術(shù)已經(jīng)建立。特別是多聚酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增技術(shù)的應(yīng)用,提供了特異(無(wú)假陽(yáng)性),敏感(可檢測(cè)出1/100萬(wàn)瘤細(xì)胞)快速(當(dāng)天可出報(bào)告)的淋巴瘤檢測(cè)手段。作者科室已建立了該項(xiàng)技術(shù)。雖然其設(shè)備條件要求比較高?勺鳛橐呻y、早期、化療后殘留病灶病例的確診。
表12-4 淋巴瘤常用標(biāo)記抗體
CD | 常用名稱 | 抗原 | |
分子量(kD) | 反應(yīng)細(xì)胞 | ||
CD1 | T6,OKT6,Leu6 | 45 | 胸腺細(xì)胞/Langerhans細(xì)胞 |
CD2 | T11,OKT11,Leu5 | 50 | 全T(E花結(jié)受體) |
CD3 | T3,OKT3,Leu4 | 19~29 | 全T(T受體相關(guān)) |
CD4 | T4,OKT4,Leu3 | 55 | T輔助(NHc II類) |
CD5 | T1,OKT4,Leu1 | 67 | 全T,偶B |
CD6 | T12,TU33 | 120 | 全T,偶B |
CD7 | CDLeu9,TU14,EA1※ | 41 | 全T |
CD8 | T8,OKT8,Leu2 | 32 | T抑制(TMHc I類) |
CD9 | J2,BA2 | 24 | T,B,髓細(xì)胞 |
CD10 | J5,BA3,ViLA1 | 100 | 前,B前,生發(fā)中心(CALLA) |
CD11 | MO1,E11,MY8 | 94~155 | 髓細(xì)胞,單核細(xì)胞 |
CD13 | MY7(MCS—2 ) | 160 | 髓細(xì)胞,單核細(xì)胞 |
CD14 | Mo2,MY4,UCHM1 | 55 | 髓細(xì)胞,單核細(xì)胞 |
CD15 | LeuM1※,,anti X-Hapten | - | 粒細(xì)胞,單核細(xì)胞,R-S細(xì)胞,上皮細(xì)胞 |
CD19 | B4 | 95 | 全B(不包括漿細(xì)胞) |
CD20 | B1 | 35 | 全B(不包括漿細(xì)胞) |
CD21 | B2 | 145 | 生發(fā)中心,套區(qū)和周圍血B濾泡樹(shù)突細(xì)胞 |
CD22 | Leu14(To15),SHCL1 | 135 | 全B |
CD23 | TU1,Blast2 | 45 | 套區(qū),?生發(fā)中心B,不包括周圍血 |
CD24 | BA1 | 45,55,65 | 全B,粒細(xì)胞,漿細(xì)胞 |
CD25 | TAC | 55 | 活化T和B(IL2受體) |
CD30 | Ki—1 | 90~110 | R-S細(xì)胞,活化T和B |
CD33 | MX9 | 67 | 髓細(xì)胞,單核細(xì)胞 |
CD34 | MY10,3C5 | 115 | 成髓細(xì)胞 |
CD45 | LCA※,T29/33, PD7/26 | 220 | 白血細(xì)胞共同抗原(T,B,M) |
CD45R | UCHL1※ | 全T | |
X4KB5※ | 全B | ||
- | TdT※ | - | 前B和前T,皮質(zhì)胸腺細(xì)胞 |
- | L26※ | 全B | |
- | HLA—DR (Ia-Like) | - | 全B(不包括漿細(xì)胞)活化T(MHc II 類) |
※可用石蠟切片標(biāo)記的McAb