基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的深入研究，高科技引入檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)實(shí)踐，特別是化學(xué)、酶、酶免疫、免疫層析、免疫標(biāo)記、電極、色譜、光譜、生物傳感器及光電分析等技術(shù)在POCT中的應(yīng)用，使醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)在臨床和社區(qū)醫(yī)療中發(fā)揮重要的作用。
1．膠體金免疫標(biāo)記技術(shù)：氯金酸(HAuC1 )在還原劑作用下，可聚合成一定大小的金顆粒，形成帶負(fù)電的疏水膠溶液，由于靜電作用而成為穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，故稱膠體金。免疫金標(biāo)記技術(shù)類似酶免疫技術(shù)，它是用膠體金標(biāo)記單克隆抗體，可用于快速檢測(cè)蛋白質(zhì)類和多肽類抗原。如：激素、HCV、HIV抗原和抗體測(cè)定。
2．免疫層析技術(shù)：將金標(biāo)抗體吸附于下端的玻璃纖維紙上，浸入樣品后，此金標(biāo)單抗即被溶解，并隨樣品上行，若樣品中含有相應(yīng)抗原時(shí)，即形成Ab—Ag—Ab一金復(fù)合物，當(dāng)上行至中段醋酸纖維薄膜，即與醫(yī)師招聘包被在膜上的抗原(抗體)結(jié)合并被固定呈現(xiàn)紅色線條(陽(yáng)性結(jié)果)。免疫層析技術(shù)問世已有十多年時(shí)間，可檢測(cè)項(xiàng)目已達(dá)數(shù)十項(xiàng)。如：心肌標(biāo)志物、激素和各種蛋白質(zhì)等，可用于測(cè)定肌鈣蛋白T和肌紅蛋白，以及D一二聚體等。定量測(cè)定甲胎蛋白和HCG的金標(biāo)檢測(cè)技術(shù)已在國(guó)內(nèi)研發(fā)成功。
3．免疫斑點(diǎn)滲濾技術(shù)：其原理與層析法相類同，將包被有特異性待測(cè)物抗原(抗體)的醋酸纖維膜放置在吸水材料上，當(dāng)樣品滴加到膜上后，樣品中的待測(cè)物質(zhì)結(jié)合到膜上的抗原(抗體)上。洗去膜上的未結(jié)合成分后，再滴加金標(biāo)抗體，若樣品中含有目標(biāo)物質(zhì)，膜上則呈現(xiàn)Ab—Ag—Ab金復(fù)合物紅色斑點(diǎn)。該技術(shù)目前已被廣泛應(yīng)用于結(jié)核分枝桿菌等細(xì)菌的抗原或抗體檢測(cè)，從而達(dá)到細(xì)菌的快速鑒定。
4．干化學(xué)技術(shù)：將一種或多種反應(yīng)試劑干燥固定在固體載體上(紙片、膠片等)，用被測(cè)樣品中所存在的液體作反應(yīng)介質(zhì)，被測(cè)成分直接與固化于載體上的干試劑進(jìn)行呈色反應(yīng)。包括：(1)單層試紙技術(shù)：包括單項(xiàng)檢測(cè)試紙和多項(xiàng)檢測(cè)試紙。單項(xiàng)試紙一次只能測(cè)1個(gè)項(xiàng)目，如目前被廣泛應(yīng)用的血糖檢測(cè)試紙、血氨檢測(cè)試紙、尿糖檢測(cè)試紙等。而多項(xiàng)檢測(cè)試紙一次在1條試紙上可同時(shí)檢測(cè)幾項(xiàng)、十幾項(xiàng)甚至幾十項(xiàng)，其技術(shù)也要相對(duì)復(fù)雜一些。(2)多層涂覆技術(shù)：由多層涂覆技術(shù)制成干片，主要包括3層：擴(kuò)散層、試劑層和支持層。樣品中加入干片后首先通過擴(kuò)散層，樣品中的蛋白質(zhì)、有色金屬等干擾成分被擴(kuò)散層中的吸附劑過濾后，液體成分滲入試劑層進(jìn)行顯色反應(yīng)，光線通過支持層對(duì)反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行比色，以此通過計(jì)算機(jī)計(jì)算樣品中待測(cè)物質(zhì)的含量。此技術(shù)目前已被廣泛應(yīng)用于血糖，血尿素氮，血脂血氨及心臟，肝臟等酶學(xué)血生化指標(biāo)的POCT5．生物和化學(xué)傳感器技術(shù)：生物及生化傳感器是指能感應(yīng)(或響應(yīng))生物和化學(xué)量，并按一定的規(guī)律將其轉(zhuǎn)換成可用信號(hào)(包括電信號(hào)、光信號(hào)等)輸出的器件或裝置。它一般由兩部分組成，其一是生物或生化分子識(shí)別元件(或感受器)，由具有對(duì)生物或化學(xué)分子識(shí)別能力的敏感材料(如由電活性物質(zhì)、半導(dǎo)體材料等構(gòu)成的化學(xué)敏感膜和由酶、微生物、DNA等形成的生物敏感膜)組成；其二是信號(hào)轉(zhuǎn)換器(換能器)，主要是由電化學(xué)或光學(xué)檢測(cè)元件(如電流、電位測(cè)量電極、離子敏場(chǎng)效應(yīng)晶體管、壓電晶體等)組成。
6．生物芯片技術(shù)：生物芯片又稱微陣列(microarray)，是20世紀(jì)末在生命科學(xué)領(lǐng)域中迅速發(fā)展起來的一項(xiàng)高新技術(shù)，它主要是指通過微加工技術(shù)和微電子技術(shù)在固相載體芯片表面構(gòu)建的微型生物化學(xué)分析系統(tǒng)，以實(shí)現(xiàn)對(duì)核酸、蛋白質(zhì)、細(xì)胞、組織以及其他生物組分的準(zhǔn)確、快速、大信息量的檢測(cè)。其基本原理是在面積很小(可達(dá)幾個(gè)平方毫米)的面相材料(玻片、硅片、金屬片、尼龍膜等)芯片表面有序地點(diǎn)陣固定排列一定數(shù)量的可尋址分子(DNA、抗體或抗原等蛋白質(zhì)及其他分子)。這些成分及相應(yīng)的標(biāo)記分子結(jié)合或反應(yīng)，結(jié)果以熒光、化學(xué)發(fā)光或酶顯色等指示，再用掃描儀或CCD攝像等技術(shù)記錄，經(jīng)計(jì)算機(jī)軟件處理和分析，最后得到所需要的信息。而組織芯片的原理是將不同的組織樣品點(diǎn)陣固定排列在一張芯片上，再通過免疫組化、原位雜交等手段對(duì)芯片上組織樣品進(jìn)行分析。由于生物芯片能夠在短時(shí)間內(nèi)分析大量的生物分子，快速準(zhǔn)確地獲取樣品中的生物信息，效率是傳統(tǒng)檢測(cè)手段的成百上千倍，因此有人認(rèn)為它將是繼大規(guī)模集成電路之后的又一次具有深遠(yuǎn)意義的科學(xué)技術(shù)革命。由于生物芯片技術(shù)在疾病篩查和早期診斷上的優(yōu)勢(shì)，已經(jīng)成為檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)發(fā)展的熱點(diǎn)之一。目前，通過基因多態(tài)性芯片，對(duì)不同的個(gè)體藥物代謝能力分析，從而實(shí)現(xiàn)臨床的個(gè)體化用藥；通過基因芯片進(jìn)行細(xì)菌檢測(cè)和細(xì)菌耐藥性分析；通過生物芯片對(duì)腫瘤、糖尿病、高血壓、傳染性疾病的篩查和檢測(cè)方面的檢驗(yàn)產(chǎn)品日臻成熟。
