藥學(xué)論文:吡格列酮對(duì)家兔局灶性腦缺血再灌注損傷細(xì)胞凋亡的影響
[摘要] 目的 探討吡格列酮對(duì)腦缺血再灌注損傷家兔細(xì)胞凋亡的影響及其機(jī)制。 方法 40只雄性家兔隨機(jī)分為5組:①假手術(shù)組(S組,n = 8);②模型組(M組,n = 8);③吡格列酮組(P組,n = 8);④GW9662+吡格列酮組(GP組,n = 8);⑤DMSO組(D組,n = 8)。除S組外,其余各組均通過(guò)線栓法建立家兔大腦中動(dòng)脈阻塞(MCAO)再灌注損傷模型。于術(shù)前30 min分別給予相應(yīng)處理。缺血120 min再灌注24 h后,對(duì)家兔進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分;HE染色觀察病理形態(tài)學(xué),TUNEL檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞凋亡。 結(jié)果 ①與S組比較,M組神經(jīng)功能評(píng)分明顯增加(P < 0.05);與M組比較,P組神經(jīng)功能評(píng)分明顯降低(P < 0.05)。②與S組比較,M組凋亡細(xì)胞明顯增加(P < 0.05);與M組比較,P組凋亡細(xì)胞明顯降低(P < 0.05)。 結(jié)論 吡格列酮可通過(guò)減輕形態(tài)學(xué)改變、抗神經(jīng)細(xì)胞凋亡,對(duì)神經(jīng)細(xì)胞發(fā)揮保護(hù)作用。
[關(guān)鍵詞] 吡格列酮;GW9662;腦缺血/再灌注;細(xì)胞凋亡
[中圖分類號(hào)] R743.3 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701(2013)04-0001-03
近年研究表明,PPARγ表達(dá)的升高對(duì)于腦缺血再灌注損傷具有一定的神經(jīng)保護(hù)作用[1],已成為腦血管病研究領(lǐng)域中的熱點(diǎn)課題。作為PPARγ的激活配體——吡格列酮(pioglitazone,PGZ)臨床上廣泛應(yīng)用于治療2型糖尿病,但有研究表明其對(duì)腦缺血再灌注損傷具有一定的神經(jīng)保護(hù)作用[2],而具體機(jī)制尚未完全闡明。本實(shí)驗(yàn)采用家兔局灶性腦缺血再灌注模型,應(yīng)用PGZ進(jìn)行預(yù)處理,觀察其對(duì)家兔術(shù)后神經(jīng)功能及細(xì)胞凋亡的影響。
1 材料與方法
1.1 動(dòng)物分組
清潔級(jí)雄性家兔40只,重量750~1 000 g。術(shù)前12 h禁食不禁水,隨機(jī)分為5組,每組8只:①假手術(shù)組(S組);②模型組(M組);③吡格列酮組(P組);④GW9662+吡格列酮組(GP組);⑤DMSO組(D組)醫(yī).學(xué)全.在.線網(wǎng)站bhskgw.cn。
1.2 試劑
吡格列酮、GW9662和10%二甲基亞砜(DMSO)(Sigma公司,美國(guó));原位末端標(biāo)記(TUNEL)試劑盒(Promega公司);電子顯微鏡(Olympus,日本)等。
1.3 動(dòng)物模型制備及處置
M組:術(shù)前20 min經(jīng)耳緣靜脈注射生理鹽水2 mL/kg,采用改良的Zea-longa[3]法制備家兔大腦中動(dòng)脈阻斷(MCAO)模型。缺血120 min后抽出線栓即可造成再灌注模型。模型成功標(biāo)志:蘇醒后出現(xiàn)左側(cè)Horner綜合征;爬行時(shí)向右側(cè)轉(zhuǎn)圈或跌倒。P組:術(shù)前20 min經(jīng)耳緣靜脈注射吡格列酮10 mg/kg。GP組:術(shù)前20 min先經(jīng)耳緣靜脈注射GW9662,劑量是0.3 mg/kg[4],5 min后再經(jīng)耳緣靜脈注射吡格列酮10 mg/kg。D組:術(shù)前20 min經(jīng)耳緣靜脈注射10% DMSO 2 mL/kg。S組:術(shù)中分離左側(cè)CCA、ICA及ECA,但不做任何缺血處理。