復(fù)方呋塞米片—呋塞米與鹽酸阿米洛利的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定復(fù)方呋塞米片中呋塞米與鹽酸阿米洛利的含量。

本方法適用于復(fù)方呋塞米片。

供試品經(jīng)超聲提取后，制成流動相溶液，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長286nm處檢測呋塞米與鹽酸阿米洛利的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 甲醇

2. 磷酸緩沖液

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按呋塞米峰計(jì)算不低于2000。呋塞米峰與鹽酸阿米洛利峰的分離度應(yīng)符合要求。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：水 甲醇 磷酸緩沖液=50 49 1

2.2 檢測波長：286nm

2.3 柱溫：室溫

1. 磷酸緩沖液

取磷酸二氫鉀13.6g，加水80mL，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0，用水稀釋至100mL。

2. 稱取供試品

取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取約適量（約相當(dāng)于呋塞米40mg與鹽酸阿米洛利5mg)。

3. 對照品溶液的制備

精密稱取鹽酸阿米洛利對照品適量，精密稱定，用甲醇溶解并稀釋成每1mL約含1 mg的溶液，作為對照品溶液（1)。

精密稱取呋塞米對照品40mg，置200mL量瓶中，加甲醇15mL與0.1mol/L鹽酸溶液2mL，超聲處理15分鐘，放冷，在精密加入對照品溶液（1)5mL，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。

4. 供試品溶液的制備

將上述供試品置于200mL量瓶中，加甲醇15mL和0.1mol/L鹽酸溶液2mL，超聲處理15分鐘，放冷，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長286nm處測定呋塞米與鹽酸阿米洛利的吸收值，計(jì)算出其含量。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.427。