方法名稱： |
黃連上清丸—鹽酸小檗堿的測定—分光光度法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法適用于中成藥黃連上清丸。 |
方法原理： |
供試品加酸性甲醇加熱回流提取，提取液經(jīng)中性氧化鋁柱凈化后，揮干并加硫酸溶解，加氯仿洗去雜質(zhì)，分液，硫酸層制成供試液，置紫外可見分光光度計，于波長345nm處測定吸收度，按鹽酸小檗堿的吸收系數(shù)計算總生物堿含量。 |
試劑： |
1. 鹽酸 2.甲醇 3 .0.05mol/L硫酸 4 .中性氧化鋁 5 .氯仿 6 .乙醇 |
儀器設(shè)備： |
1.紫外可見分光光度計 2 .小玻璃柱 3.索氏提取器 |
試樣制備： |
1. 稱取供試品 精密稱取本品粉末(過三號篩-50目)試樣3g。 2. 供試品溶液的制備 將供試品(同時另取本品粉末進行水分測定)置索式提取器中，用適量鹽酸-甲醇(1:00)加熱回流提取，至提取液無色為止。將提取液轉(zhuǎn)移至100mL量瓶中，用少量鹽酸-甲醇(1:100)洗滌容器，洗液并入提取液中，并加至刻度。精密量取10mL，加入氧化鋁柱(內(nèi)徑約9mm，中性氧化鋁15g，濕法裝柱，用乙醇30mL預(yù)洗)上，用乙醇70mL分次洗脫，收集洗脫液至100mL量瓶中，加乙醇至刻度，精密量取50mL，置坩堝內(nèi)，水浴揮干乙醇，用硫酸液(0.05mol/L)20mL分次溶解，轉(zhuǎn)至分液漏斗中，用氯仿萃取，每次加氯仿10mL，至氯仿層無色，分取硫酸層置50mL量瓶中，加0.05mol/L硫酸溶液至刻度，搖勻，作為供試品溶液。 注1：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一，“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。 注2：“水分測定“用烘干法。取供試品2-5g，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超過5mm，疏松樣品不超過10mm，精密稱定，打開瓶蓋在100-105℃干燥5小時，將瓶蓋蓋好，移至干燥器中，冷卻30分鐘，精密稱定重量，再在上述溫度干燥1小時，冷卻，稱重，至連續(xù)兩次稱重的差異不超過5mg為止根據(jù)減失的重量，計算供試品中含有水分的百分?jǐn)?shù)。 注3：吸附柱色譜：色譜柱為內(nèi)徑均勻，下端縮口的硬質(zhì)玻璃管，下端用棉花或玻璃纖維塞住，管內(nèi)裝吸附劑。 注4：濕法裝柱：將吸附劑與洗脫劑混合，攪拌除去空氣泡，徐徐傾入色譜柱中，然后加入洗脫劑將附著管壁的吸附劑洗下，使色譜柱面平整。俟填裝吸附劑所用的洗脫劑從色譜柱自然流下，液面與柱面相平時，即加供試品溶液。 |
操作步驟： |
1.供試品的測定 供試品測定液照分光光度法，于波長345nm處測定吸收度。 注：分光光度法應(yīng)以配制供試品的同批溶劑為對照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波長作為測定波長，一般供試品的吸收度讀數(shù)，以在０.３－０.７之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度偏低。狹縫寬度的選擇，應(yīng)以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)。由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測定供試品的吸收度后應(yīng)減去空白讀數(shù)，再計算含量。 |
參考文獻： |
謝秀瓊，郭力，王富. 黃連上清丸中小檗堿的含量測定. 中國藥房，1996，7(3)：109-110. |
