方法名稱： |
六味地黃丸-丹皮酚測(cè)定-高效毛細(xì)管電泳法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效毛細(xì)管電泳法測(cè)定六味地黃丸中丹皮酚的含量。 本方法適用于中成藥六味地黃丸。 |
方法原理： |
供試品粉碎后，與硅藻土研勻，無(wú)水乙醇超聲波振蕩提取，過(guò)濾后定容，加入內(nèi)標(biāo)，用高效毛細(xì)管電泳儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)274nm處檢測(cè)丹皮酚的吸收值，計(jì)算其含量。 |
試劑： |
1. 硼砂 2. 乙醇 3. 十二烷基硫酸鈉(SDS) 4. 蘆丁 5. 丹皮酚對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所) 6. 水為去離子水 |
儀器設(shè)備： |
1 儀器 1.1 高效毛細(xì)管電泳儀 1.2 色譜柱 未涂層熔硅彈性石英毛細(xì)管內(nèi)徑75μm；，柱長(zhǎng)55cm，有效柱長(zhǎng)50cm。 1.3紫外吸收檢測(cè)器 2 色譜條件 2.1緩沖鹽： 20mmol/L SDS－50mmol/L硼砂 2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：274nm 2.3 重力進(jìn)樣(10cm×5S) 2.4運(yùn)行電壓：15KV 2.5 電泳溫度：20℃ |
試樣制備： |
1. 對(duì)照品溶液的制備 精確稱取取丹皮酚對(duì)照品9.1mg于10mL量瓶中，無(wú)水乙醇溶解并稀釋至刻度，作為對(duì)照品溶液。精密吸取丹皮酚對(duì)照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml于10ml量瓶中，各加入蘆丁內(nèi)標(biāo)液1ml，無(wú)水乙醇溶液定容至刻度。 2. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備 稱取蘆丁52mg，用無(wú)水乙醇溶解并稀釋至100mL，作為內(nèi)標(biāo)。 3.供試品溶液的制備 取六味地黃丸粉碎后，稱取粉末3g，與5g硅藻土(色譜載體，40～60目)混研，研勻，烘干，無(wú)水乙醇超聲波振蕩提取30min，過(guò)濾后定容至50mL，取該溶液8mL，加入內(nèi)標(biāo) 1mL，無(wú)水乙醇稀釋至10mL，作為供試品溶液�！� |
操作步驟： |
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立 依法進(jìn)樣測(cè)定，以丹皮酚對(duì)照品峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積的比值對(duì)其濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算線性回歸方程。得Y=-0.0279X－0.0411，r=0.9997，線性范圍為18.2～91mg/L。 2. 樣品測(cè)定 取供試品溶液，依法進(jìn)樣測(cè)量，記錄各組份峰面積值，計(jì)算沒(méi)食子酸的含量。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
參考文獻(xiàn)： |
趙新峰，孫毓慶，膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜法測(cè)定牡丹皮及六味地黃丸中丹皮酚的含量，沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2002，19（1)：35～37，55 |
