方法名稱： |
小兒熱速清顆粒——黃芩苷的含量——高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法測定小兒熱速清顆粒中黃芩苷的含量。 本方法適用于小兒熱速清顆粒中黃芩苷的含量測定。 |
方法原理： |
用反相高效液相色譜法分析黃芩苷，在277nm處檢測黃芩苷的吸收值，計(jì)算出其含量 |
試劑： |
1. 甲醇（色譜純) 2.乙醇（色譜純) 3.磷酸(分析純) |
儀器設(shè)備： |
1 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 色譜柱: Hypersil ODS (100 mm ×4. 6 mm ,5μm)。 1.3 紫外吸收檢測器 2 色譜條件 2.1 流動相：甲醇 水 磷酸 = 47 53 0.2，流速:1.0 ml/min 2.2 檢測波長：277nm 2.3柱溫：30°C |
試樣制備： |
1.供試品陰性對照溶液的制備 按處方量取除黃芩外其他各味藥材,加入適量水煎煮60min ,煎液加入95 %乙醇直至不產(chǎn)生沉淀,過濾,取續(xù)濾液即得。 2.供試品溶液的制備 按處方量取加入適量水煎煮60min，煎液加入95 %乙醇直至不產(chǎn)生沉淀，過濾，取續(xù)濾液即得。 3.對照品溶液的制備 精密稱取黃芩苷對照品7.3mg ,置于25ml 容量瓶中,加50 %甲醇至刻度,水浴加熱溶解,冷卻至室溫,搖勻,即得黃芩苷對照液。 4. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 |
操作步驟： |
1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密吸取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液20μL注入高效液相色譜儀，用紫外檢測器測定黃芩苷的響應(yīng)值，以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度對峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。 2. 供試品的測定 精密吸取上述供試品溶液及陰性對照溶液分別進(jìn)樣20μ注入高效液相色譜儀，用紫外檢測器測定黃芩苷的吸收值，計(jì)算出其含量。 |
參考文獻(xiàn)： |
周萍，曹臣，喻堅(jiān)柏. 小兒熱速清顆粒提取工藝的研究. 湖南中醫(yī)雜志，2004，20（4)：78-79 |
