水飛薊－水飛薊賓或異水飛薊賓－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定水飛薊中水飛薊賓或異水飛薊賓的含量。

本方法適用于菊科植物水飛薊Silybum marianum (L.) Gaertn.的干燥成熟果實。

本品粉末置具塞錐形瓶中，加75%甲醇加熱回流，放冷，用75%甲醇補足減失的重量，搖勻，靜置，上清夜進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長287nm處檢測水飛薊賓、異水飛薊賓的吸收值，計算出其含量。

1. 甲醇

2. 冰醋酸

1 儀器

1.1高效液相色譜儀

1.2色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按水飛薊賓或異水飛薊賓峰計算應不低于5000。

1.3 紫外吸收檢測器

2色譜條件

2.1流動相：甲醇 水 冰醋酸＝48 52 1

2.2檢測波長：287nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

精密稱取本品粉末（過三號篩)0.5g, 為供試品。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取水飛薊賓和異水飛薊賓混合對照品12mg，置50mL量瓶中，加甲醇適量使溶解，并稀釋至刻度，搖勻；精密量取5mL，置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

3. 供試品溶液的制備

取本品粉末（過三號篩)0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加75%甲醇50mL，密塞，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液作為供試品溶液。

分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長287nm處測定水飛薊賓（C₂₅H₂₂O₁₀)的峰面積，計算出其含量。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005版，一部，p56。