木通－齊墩果酸、常春藤皂苷元的測(cè)定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定木通中齊墩果酸、常春藤皂苷元的含量。

本方法適用于木通科植物木通Akebia quinata(Thunb.) Decne.、三葉木通Akebia trifoliata (Thunb.) Koidz.或白木通Akebia trifoliata (Thunb.) Koidz.var.australis (Diels) Rehd.的干燥藤莖。

本品粉末加甲醇超聲提取，濾液蒸干，殘?jiān)�水溶后，加水飽和正丁醇提取，提取液蒸干，殘�(jiān)�加甲醇、鹽酸、加熱水解，水解物用三氯甲烷提取，蒸干，殘?jiān)�加甲醇溶解、定容，搖勻，濾過(guò)，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)210nm處檢測(cè)齊墩果酸和常春藤皂苷元的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 甲醇

2 .正丁醇

3 .鹽酸

4 .三氯甲烷

5 .冰醋酸

6 .三乙胺

1 儀器

1.1高效液相色譜儀

1.2色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按齊墩果酸峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2色譜條件

2.1流動(dòng)相：甲醇 水 冰醋酸 三乙胺＝87 13 0.04 0.02

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：210nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱(chēng)取供試品

精密稱(chēng)取本品粉末（過(guò)四號(hào)篩)2g, 為供試品。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取其墩果酸對(duì)照品、常春藤皂苷元對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL各含1mg的混合溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品粉末（過(guò)四號(hào)篩)約2g，精密稱(chēng)定，加甲醇50mL，超聲處理（功率250W，頻率50kHz)30分鐘，濾過(guò)，殘?jiān)�用甲醇適量洗滌，合并濾液與洗液，回收溶劑至干，殘?jiān)�加�?0 mL溶解，用水飽和正丁醇振搖提取3次，每次20 mL，合并提取液，蒸干，殘?jiān)�加甲�?0 mL、鹽酸2 mL， 加熱水解4小時(shí)，水解物加水10 mL，用三氯甲烷振搖提取2次，每次20 mL，合并提取液，回收溶劑至干，殘?jiān)�加甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱(chēng)取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)210nm處測(cè)定齊墩果酸（C₃₀H₄₈O₃)和常春藤皂苷元（C₃₀H₄₈O₄)的峰面積，計(jì)算出其含量。