銀杏葉片－萜類內(nèi)酯的測定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定銀杏葉片中萜類內(nèi)酯的含量。

本方法適用于中成藥銀杏葉片。

本品粉末加甲醇超聲處理，放冷，補重，搖勻，濾過，取續(xù)濾液回收甲醇，殘渣加水溶解，用乙酸乙酯提取數(shù)次，回收乙酸乙酯提取液，殘渣加甲醇溶解、定容，搖勻，溶液進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用蒸發(fā)光散射檢測器，計算含量。

1. 甲醇

2. 正丙醇

3. 四氫呋喃

1 儀器

1.1高效液相色譜儀

1.2色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按白果內(nèi)酯峰計算應不低于2500。

1.3 紫外吸收檢測器

2色譜條件

2.1流動相：正丙醇 四氫呋喃 水＝1 15 84

2.2柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取本品20片，除去包衣，精密稱定，研細，取約相當于萜類內(nèi)酯19.2mg的粉末，精密稱定，為供試品。

2. 對照品溶液的制備

分別精密稱取白果內(nèi)酯對照品、銀杏內(nèi)酯A對照品、銀杏內(nèi)酯B對照品和銀杏內(nèi)酯C對照品適量，加甲醇制成每1mL各含1mg、1mg、1mg、0.5mg的混合溶液�；蛉∫褬耸景坠麅�(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C含量的銀杏葉對照提取物0.15g，精密稱定，加水10mL，照供試品溶液的制備方法，自‘置水浴中溫熱使溶散’起，同法制成對照提取物溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品20片，除去包衣，精密稱定，研細，取約相當于萜類內(nèi)酯19.2mg的粉末，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率33kHz)20分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液20 mL，回收甲醇，殘渣加水10 mL，置水浴中溫熱使溶散，加2%鹽酸溶液2滴，用乙酸乙酯振搖提取4次（15 mL，10 mL，10 mL，10 mL)合并提取液，用5%醋酸鈉溶液20 mL洗滌，分取醋酸鈉液，用乙酸乙酯10 mL洗滌，合并乙酸乙酯提取液及洗液，用水洗滌2次，每次20 mL，合并水液，用乙酸乙酯10 mL洗滌，合并乙酸乙酯液，回收至干，殘渣用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至5 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取對照品溶液（或?qū)φ仗崛∥锶芤?5mL、20mL和供試品溶液20mL，注入高效液相色譜儀，用外標兩點法對數(shù)方程分別計算白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C的含量。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005版，一部，p597。