方法名稱: |
曼地亞紅豆杉枝葉—紫杉醇的含量測定—HPLC-UV |
應用范圍: |
用于曼地亞紅豆杉枝葉中紫杉醇的含量測定 |
方法原理: |
本品粉末用超聲提取、濃縮、萃取等一系列處理后,經(jīng)液相色譜儀分離,在227nm處測定,按外標法計算含量。 |
儀器設備及實驗條件: |
儀器設備 BT8100型泵;K-2501型紫外檢測器;N 2000雙通道色譜工作站。 | 色譜條件 色譜柱:phenomenex C18 ( 250mm×4.60mm,5μm);流動相:甲醇-水 (65∶35) ;流速:0.7mL /min;檢測波長:227nm;柱溫:25℃。 |
試樣制備: |
對照品溶液的制備 精密稱取紫杉醇對照品5.1mg,以甲醇溶解并定溶于10mL容量瓶中,制成5.0μg/mL的紫杉醇對照品儲備液。分別吸取 0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.00mL對照品儲備液,以甲醇定溶于5mL容量瓶中,制成濃度分別為10.2,20.4,40.8,61.2,81.6,102μg/mL的標準液,供繪制標準曲線時使用。 | 供試品溶液的制備 精密稱取 5.0000g曼地亞紅豆杉干枝葉粉末,加入100mL無水乙醇,冷浸過夜,超聲處理40min,靜置過濾,濾渣再以100 mL無水乙醇超聲30min,靜置過濾,合并濾液,于45℃ 真空濃縮至 18mL左右,加入2mL蒸餾水,以50mL正己烷萃取,再以25mL正己烷萃取2次。乙醇相于45℃真空濃縮至無醇,濃縮物以50mL氯仿充分溶解,加入50mL1 mol /L碳酸鉀溶液 (含5%氯化鈉 )攪拌20min,靜置分層,氯仿相再以25mL該碳酸鉀溶液洗滌2次。氯仿相轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶,并以氯仿定容,作供試品溶液。 |
操作步驟: |
精密吸取對照品溶液和供試品溶液各6μL,注入液相色譜儀,依上述色譜條件測定,按外標法計算含量。 |
附件: |
點擊下載 (解壓密碼:bhskgw.cn)
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備注: |
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參考文獻: |
王志剛,周春山,顏家良等.HPLC 法測定曼地亞紅豆杉枝葉中紫杉醇的含量.應用化工.2007,36(1):84~86 |