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絡(luò)石藤—絡(luò)石苷的測定方法—RP-HPLC

  
方法名稱:
  絡(luò)石藤—絡(luò)石苷的測定— RP-HPLC
應(yīng)用范圍:
  本方法適用于絡(luò)石藤中絡(luò)石苷含量的測定
方法原理:
 本品粉末加甲醇超聲提取,經(jīng)液相色譜分離,在225 nm處測定峰面積,外標(biāo)法計算含量
儀器設(shè)備及實驗條件:
 

儀器    高效液相色譜儀(美國Waters公司,515泵),Waters2478 UV檢測器,7725i動進(jìn)樣閥

   試劑    絡(luò)石苷對照品為自制

    色譜條件    色譜柱:Symmetry C18柱(4.6 mm×150mm,5 μm);流動相:甲醇-0.1 %磷酸溶液(33.3:66.7);流速1.0 mL/min;檢測波長:225 nm;進(jìn)樣量:l0 μL;柱溫:28 ℃
試樣制備:
 

對照品溶液制備    精密稱取絡(luò)石苷對照品10.50 mg25 mL量瓶中,用25 %乙腈定容(420 μg/mL)成儲備液,即得,用時適當(dāng)稀釋。

    供試品溶液制備    取本品粉末10 g,精密稱定,置250 mL燒瓶中用甲醇加熱回流提取3次,每次150 mL,濾過,合并濾液,回收甲醇至近干,加500 mL蒸餾水,通過AB-8大孔吸附樹脂柱(內(nèi)徑1.0 cm,長20 cm),用20 %乙醇1000 mL洗脫,再用40 %乙醇1000 mL洗脫,收集40 %乙醇洗脫液,回收至干,殘渣加甲醇定量轉(zhuǎn)移至250 mL量瓶中定容,搖勻,用0.45 μm微孔濾膜濾過,即得供試品溶液。
操作步驟:
  分別精密吸取絡(luò)石苷對照液以及絡(luò)石藤供試品溶液各10 μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標(biāo)法計算絡(luò)石苷含量。
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:bhskgw.cn)
備注:
 
參考文獻(xiàn):
  朱三華,陳海生,譚興起等. RP-HPLC法測定絡(luò)石藤中的絡(luò)石苷含量. 中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志.2006, 23(3):215~217
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