方法名稱(chēng)： |
兒茶—兒茶素和表兒茶素—HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
用于兒茶中主要成分兒茶素及表兒茶素含量的測(cè)定 |
方法原理： |
本品用甲醇-水（1：1)超聲提取，經(jīng)液相色譜儀分離，在280nm測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算含量。 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器設(shè)備 PE LC-200 高效液相色譜儀 LC295紫外可見(jiàn)檢測(cè)器；HP3295 積分儀。 色譜條件 色譜柱：Phenomenex OD(2) 柱(5μm，4.6 mm×150 mm) ；流動(dòng)相：0.04mol·L -1檸檬酸-N，N-二甲基甲酰胺-四氫呋喃( 45∶8∶2 )；流速：0.8 mL·min-1 。柱溫：35 ℃。檢測(cè)波長(zhǎng)：280 nm。進(jìn)樣量：5～10μL。 |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液制備 精密稱(chēng)取兒茶素對(duì)照品16.07mg及表兒茶素對(duì)照品13.21mg，置25mL容量瓶中, 以甲醇-水(1∶1) 超聲溶解并稀釋至刻度， 搖勻，即得對(duì)照品溶液。 供試品溶液的制備 取兒茶樣品2份，每份0.02 g，分別精密稱(chēng)定，置50mL容量瓶中，加甲醇-水(1∶1) 40mL超聲20min溶解，并以甲醇-水(1∶1) 稀釋至刻度，溶液過(guò)0.45μm 濾膜，即得供試品溶液。 |
操作步驟： |
精密吸取對(duì)照液以及供試品溶液5～10μL，分別注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定峰面積。按外標(biāo)計(jì)算兒茶素和表兒茶素含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
王鋼力，于建東，田金改等. 兒茶藥材化學(xué)成分分析—反相高效液相色譜法測(cè)定兒茶中兒茶素和表兒茶素的含量. 藥物分析雜志.1999，19（2)：88～90 |
