| 公開(kāi)(公告)號(hào) | CN1915980A |
| 公開(kāi)(公告)日 | 2007.02.21 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200610095100.2 |
| 申請(qǐng)日期 | 2006.09.07 |
| 專利名稱 | 肌肽類(lèi)似物制備方法 |
| 主分類(lèi)號(hào) | C07D233/64(2006.01)I |
| 分類(lèi)號(hào) | C07D233/64(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 重慶大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 周小華;陸 瑤;左瑞雅 |
| 地址 | 400044重慶市沙坪壩區(qū)沙正街174號(hào)重慶大學(xué)專利中心 |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 重慶大學(xué)專利中心 |
| 代理人 | 胡正順 |
| 國(guó)省代碼 | 重慶;85 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種肌肽類(lèi)似物制備方法，其特征在于其具體的方法步驟如下： (1)制備合成肌肽類(lèi)似物溶劑 在四氫呋喃溶液中，加入pH值為8.5～9.0的濃度為0.1mol/L的磷酸緩沖溶液，磷酸緩沖溶液∶四氫呋喃溶液的的體積比為1∶1000～1250，攪拌均勻； (2)制備合成肌肽類(lèi)似物的底物溶液 按照4，5二羧酸咪唑∶L-丙氨酸的摩爾比為1∶3～3.5的比例，將4，5二羧基酸咪唑與L-丙氨酸混合并攪拌均勻后，再按照4，5二羧基酸咪唑和L-丙氨酸總重量∶蒸餾水體積為1∶1～1.5的比例，加入蒸餾水并進(jìn)行攪拌溶解； (3)制備合成肌肽類(lèi)似物反應(yīng)液 在(1)、(2)步完成后，按照α-胰凝乳蛋白酶粉質(zhì)量：第(1)步制備合成肌肽類(lèi)似物溶劑∶第(2)步制備的合成肌肽類(lèi)似物的底物溶液體積比為1∶32.5～100∶0.04～0.06的比例，先在第(1)步制備合成肌肽類(lèi)似物的溶劑中，加入第(2)步制備的合成肌肽類(lèi)似物的底物溶液，攪拌混合均勻后，再置于夾層反應(yīng)器中，并給反應(yīng)器緩慢加熱或在夾層中通入恒溫水，待反應(yīng)器中混合液的溫度升至40～60℃時(shí)，再加入α-胰凝乳蛋白酶粉，在轉(zhuǎn)速為200～400r/min下，攪拌反應(yīng)1～2h，就制備出4-丙氨酰胺，5-羧酸咪唑產(chǎn)率為63.4～72.5％肌肽類(lèi)似物的反應(yīng)液； (4)分離沉淀 在第(3)步反應(yīng)完成后，將肌肽類(lèi)似物反應(yīng)液置于離心裝置中，以3000～5000r/min的速度，進(jìn)行離心分離10～20min，提取上層清液，然后按照上層清液∶無(wú)水乙醇的體積比為1∶1～2的比例，在上層清液中，加入無(wú)水乙醇，經(jīng)攪拌均勻后，靜止10～20min，然后過(guò)濾，分別收集濾渣和四氫呋喃-乙醇濾液； 再生乙醇及四氫呋喃 (5)將第(4)步收集的四氫呋喃-乙醇濾液，置于真空濃縮器中，在溫度為70～90℃、及真空度為-0.8～-0.01MPa的條件下，進(jìn)行真空濃縮，回收乙醇，然后在回收乙醇后的四氫呋喃溶液中，加入4A分子篩，4A分子篩的加入重量為四氫呋喃溶液體積的2～5％，經(jīng)攪拌處理2～3h后，再進(jìn)行過(guò)濾，分別收集四氫呋喃濾液和4A分子篩濾渣，對(duì)收集的4A分子篩濾渣，進(jìn)行高溫處理； (6)進(jìn)行樹(shù)脂交換處理 將第(4)步收集的濾渣，用20～30倍的蒸餾水溶解，然后按照濾渣∶陽(yáng)離子交換樹(shù)脂的重量比為1∶10～15的比例，在濾渣溶液中，加入001×7或001×4陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，進(jìn)行攪拌交換30～60min，然后進(jìn)行過(guò)濾，棄濾液，收集樹(shù)脂濾渣； (7)制備肌肽類(lèi)似物凍干粉 將第(6)步收集的樹(shù)脂濾渣，用蒸餾水洗滌2～3次后，再過(guò)濾，棄濾液，收集樹(shù)脂濾渣，然后將樹(shù)脂濾渣置入交換柱中，用0.1～0.2mol/L的HCL洗脫，在洗脫過(guò)程中，其洗脫液的流速為每小時(shí)3～5倍陽(yáng)離子樹(shù)脂重量，并用紫外檢測(cè)器于310nm檢測(cè)流出的洗脫液，用分部吸收器，收集310nm出現(xiàn)特征吸收峰的洗脫液，然后將該洗脫液置于截留分子量為100Da的透析袋中，用水透析5～7h，最后置于真空濃縮器中，在溫度為80～90℃、真空度為-0.8～-0.01MPa條件下，減壓濃縮至原體積的1/10～1/5，再用凍干設(shè)備，在溫度為-50～-60℃、壓力為25～50pa條件下，進(jìn)行冷凍干燥成肌肽類(lèi)似物4-丙氨酰胺-5-羧酸咪唑含量為93.5～95.5％的肌肽類(lèi)似物凍干粉。 |
| 摘要 | 一種肌肽類(lèi)似物制備方法，屬于醫(yī)藥抗氧化活性物質(zhì)制備技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明利用酶為催化劑，在催化反應(yīng)過(guò)程中，不進(jìn)行基團(tuán)保護(hù)、也不使用縮合劑，因此制備工藝簡(jiǎn)單、反應(yīng)條件溫和、操作簡(jiǎn)便、充分利用資源、無(wú)環(huán)境污染、生產(chǎn)成本低、便于工業(yè)化生產(chǎn)。采用本發(fā)明制備出的肌肽類(lèi)似物的純度高達(dá)93.5～95.5％、質(zhì)量好、抗氧化作用強(qiáng)，可廣泛用作醫(yī)藥、食品、保健品、化妝品、飼料等的抗氧化活性物質(zhì)。 |
| 國(guó)際公布 |
