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檢測和預(yù)測對β激動劑的支氣管擴張反應(yīng)的方法

公開(公告)號 CN1985005A  
公開(公告)日 2007.06.20  
申請(專利)號 CN200480043197.1  
申請日期 2004.04.29  
專利名稱 檢測和預(yù)測對β激動劑的支氣管擴張反應(yīng)的方法  
主分類號 C12Q1/68(2006.01)I  
分類號 C12Q1/68(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 印度科學(xué)工業(yè)研究所;印度尼古拉斯皮拉瑪有限公司  
發(fā)明(設(shè)計)人 里圖什里·庫克雷提;帕拉·巴特那加;錢德里卡·勞;巴爾拉姆·高希;薩米爾·庫馬·布拉馬查里;蘭迪普·古勒里亞;奇莫伊·達斯  
地址 印度新德里  
頒證日  
國際申請 2004-04-29 PCT/IB2004/001286  
進入國家日期 2006.11.30  
專利代理機構(gòu) 北京銀龍知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司  
代理人 鐘 晶  
國省代碼 印度;IN  
主權(quán)項 一種用于預(yù)測和檢測哮喘病患者對于β2激動劑的支氣管擴張反應(yīng)的方法,所述方法包括以下步驟: (a)通過適當(dāng)途徑給予患者藥學(xué)活性劑量的已知和速效的β2激動劑, (b)對哮喘患者對于β2激動劑的表型良好反應(yīng)者和不良反應(yīng)者進行鑒定和歸類, (c)從患有哮喘的反應(yīng)者、非反應(yīng)者和正常個體的血液樣品中分離基因組DNA, (d)設(shè)計并合成能夠擴增與哮喘有關(guān)的β2AR基因或基因座編碼區(qū)的、具有SEQ ID No.2和3的寡核苷酸引物, (e)使用SEQ ID No.2和3,擴增表型上屬于反應(yīng)者和非反應(yīng)者哮喘病人的基因組DNA, (f)對步驟(e)中獲得的擴增的PCR產(chǎn)物進行測序,并通過與β2AR基因或基因座的已知序列計算比較,對經(jīng)測序的、步驟(e)中獲得的PCR產(chǎn)物的非同義多態(tài)性或單核苷酸多態(tài)性(SNP)進行鑒定,來檢測特定β2AR等位基因變異體, (g)設(shè)計具有SEQ ID No.4和5的寡核苷酸引物,直至步驟(f)中鑒定的非同義多態(tài)性或單核苷酸多態(tài)性(SNP)的倒數(shù)第二位,篩選反應(yīng)者和非反應(yīng)者哮喘個體的46位多態(tài)性(其與本發(fā)明公開的每個SEQID No.1的堿基位置857相同),來檢測β2AR基因座或基因的特定SNP,所述過程包括下述PCR條件: (i)96℃,將分離得到的DNA變性10秒, (ii)55℃,使用SEQ ID No.4和5的引物對步驟(i)中變性的DNA退火5秒, (iii)60℃,將步驟(ii)中退火后的DNA延伸30秒, (h)使用具有SEQ ID No.6,7,8和9的等位基因特定寡核苷酸引物,驗證正常對照個體和步驟(g)中獲得的哮喘病人(包括反應(yīng)者和非反應(yīng)者)中SNP或特定β2AR等位基因變異體的存在,其中所述寡核苷酸引物特異性地與靶SNP或特定β2AR等位基因變異體雜交,其中哮喘病人中,該靶SNP或特定β2AR等位基因變異體具有β2AR基因或基因座的46位(其與本發(fā)明公開的每個SEQ ID No.1的堿基位置857相同)核苷酸A至G(A→G)的替換。  
摘要 本發(fā)明涉及用于預(yù)測個體對β激動劑的支氣管擴張反應(yīng)的方法。本發(fā)明特別涉及β2AR基因的特定等位基因變異體的檢測和它們作為對β激動劑反應(yīng)的藥物遺傳學(xué)標記物的用途。  
國際公布 2005-11-10 WO2005/106027 英  
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