公開(公告)號 | CN1884554A |
公開(公告)日 | 2006.12.27 |
申請(專利)號 | CN200610085445.X |
申請日期 | 2006.06.16 |
專利名稱 | 用于治療腫瘤轉(zhuǎn)移的真核表達載體及其構(gòu)建方法 |
主分類號 | C12N15/79(2006.01)I |
分類號 | C12N15/79(2006.01)I;C12N15/65(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;A61K38/57(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 南京大學 |
發(fā)明(設(shè)計)人 | 孫國勛;張辰宇;李朝軍;項 陽 |
地址 | 210093江蘇省南京市漢口路22號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構(gòu) | 南京知識律師事務(wù)所 |
代理人 | 高桂珍 |
國省代碼 | 江蘇;32 |
主權(quán)項 | 一種Bikunin真核細胞表達載體,其特征是該載體表達產(chǎn)物為含有Myc和組氨酸標簽的Bikunin融合蛋白。 |
摘要 | 本發(fā)明屬于生制藥技術(shù)領(lǐng)域,所述構(gòu)建含有Bikunin的真核表達載體pSecTag2B-Bikunin所表達的產(chǎn)物為帶有Myc和組氨酸標簽的融合蛋白。本發(fā)明應(yīng)用RT-PCR方法,從人肝細胞系L02擴增Bikunin,將其克隆于pMD18-T SimpleVector中構(gòu)建pMD18-T-Bikunin,經(jīng)酶切、PCR及測序鑒定后,將Bikunin亞克隆至真核表達載體pSecTag 2B中,經(jīng)酶切及PCR鑒定,證明構(gòu)建成功含有Bikunin的真核表達載體pSecTag2B-Bikunin。用磷酸鈣沉淀法轉(zhuǎn)染NIH3T3細胞,24小時后,Western blot檢測濃縮25倍的細胞培養(yǎng)上清,證明有融合蛋白的表達。該蛋白作為生物制劑可用于腫瘤轉(zhuǎn)移的治療。 |
國際公布 |