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用于治療腫瘤轉(zhuǎn)移的真核表達載體及其構(gòu)建方法

公開(公告)號 CN1884554A  
公開(公告)日 2006.12.27  
申請(專利)號 CN200610085445.X  
申請日期 2006.06.16  
專利名稱 用于治療腫瘤轉(zhuǎn)移的真核表達載體及其構(gòu)建方法  
主分類號 C12N15/79(2006.01)I  
分類號 C12N15/79(2006.01)I;C12N15/65(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;A61K38/57(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 南京大學  
發(fā)明(設(shè)計)人 孫國勛;張辰宇;李朝軍;項 陽  
地址 210093江蘇省南京市漢口路22號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 南京知識律師事務(wù)所  
代理人 高桂珍  
國省代碼 江蘇;32  
主權(quán)項 一種Bikunin真核細胞表達載體,其特征是該載體表達產(chǎn)物為含有Myc和組酸標簽的Bikunin融合蛋白。  
摘要 本發(fā)明屬于生制藥技術(shù)領(lǐng)域,所述構(gòu)建含有Bikunin的真核表達載體pSecTag2B-Bikunin所表達的產(chǎn)物為帶有Myc和組氨酸標簽的融合蛋白。本發(fā)明應(yīng)用RT-PCR方法,從人肝細胞系L02擴增Bikunin,將其克隆于pMD18-T SimpleVector中構(gòu)建pMD18-T-Bikunin,經(jīng)酶切、PCR及測序鑒定后,將Bikunin亞克隆至真核表達載體pSecTag 2B中,經(jīng)酶切及PCR鑒定,證明構(gòu)建成功含有Bikunin的真核表達載體pSecTag2B-Bikunin。用磷酸鈣沉淀法轉(zhuǎn)染NIH3T3細胞,24小時后,Western blot檢測濃縮25倍的細胞培養(yǎng)上清,證明有融合蛋白的表達。該蛋白作為生物制劑可用于腫瘤轉(zhuǎn)移的治療。  
國際公布  
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