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WSSV的FQ-PCR診斷試劑盒及檢測方法

公開(公告)號(hào) CN1282750C  
公開(公告)日 2006.11.01  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200510060040.6  
申請(qǐng)日期 2005.03.25  
專利名稱 WSSV的FQ-PCR診斷試劑盒及檢測方法  
主分類號(hào) C12Q1/68(2006.01)I  
分類號(hào) C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/25(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 舟山市疾病預(yù)防控制中心;杭州博康生物科技有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 王忠發(fā);邵俊斌;王建躍;沃健兒;何偉賢;薛 憶  
地址 316000浙江省舟山市定海區(qū)解放西路231號(hào)  
頒證日  
國際申請(qǐng)  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 舟山固浚專利事務(wù)所  
代理人 范榮新  
國省代碼 浙江;33  
主權(quán)項(xiàng) 一種WSSV的FQ-PCR診斷試劑盒,有試劑容器,其特征是其中有包裝下列試劑的試劑容器: TaqMan Buffer液; 特異性引物-1; 特異性引物-2; 特異性TaqMan探針; 其中, 特異性引物-1的序列為:5’-CCA GAG ATG GGA GTAACA CGT-3’; 特異性引物-2的序列為:5’-CTC CTC TGTTGC GAATAC TTC TAAAT-3’; 特異性TaqMan探針的序列為:5’-FAM-CGG ACC TTG TGC AAC TCT CCA CCTCC-TAMARA-3’。  
摘要 已用于WSSV診斷的FQ-PCRe有耗時(shí)較長,存在非特異擴(kuò)增產(chǎn)物或引物二聚體導(dǎo)致的假陽性結(jié)果缺陷。TaqMan PCR有更高的靈敏性和高精確性,但尚未應(yīng)用于WSSV的診斷。本發(fā)明提供的WSSV的FQ-PCR診斷試劑盒和方法,試劑盒中所裝的即檢測方法中所用反應(yīng)體系中有2×TaqMan Buffer液、特異性引物-1、特異性引物-2、TaqMan探針等等;PCR儀中的DNA操作過程是先作93℃下預(yù)變性2分鐘;再作93℃下變性5秒鐘、60℃下退火延伸30秒鐘、60℃下單點(diǎn)熒光檢測的循環(huán)40次。本發(fā)明提供的WSSV的FQ-PCR診斷試劑盒和方法,配備了所有無法從市場上購得所需的各種試劑;達(dá)到了高靈敏度、高重復(fù)性、高特異性的指標(biāo),另外還有所需待測樣本數(shù)量要求低和檢測所需時(shí)間短的特點(diǎn)。  
國際公布  
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