| 公開(公告)號 | CN1276093C |
| 公開(公告)日 | 2006.09.20 |
| 申請(專利)號 | CN01114690.7 |
| 申請日期 | 2001.05.15 |
| 專利名稱 | 一種檢測丙肝病毒RdRp酶的方法，和載體以及用其轉(zhuǎn)化的細胞株及應(yīng)用 |
| 主分類號 | C12Q1/25(2006.01)I |
| 分類號 | C12Q1/25(2006.01)I;C12Q1/70(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 李衛(wèi)云 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 李衛(wèi)云 |
| 地址 | 510623廣東省廣州市珠江新城南天廣場皇朝閣1005，1001 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | |
| 代理人 | |
| 國省代碼 | 廣東;44 |
| 主權(quán)項 | 一種檢測丙肝病毒RdRp酶的方法，該方法包括下列步驟： a.制備含指示的重組載體，該載體含有在T3或T7或SP6噬菌體啟動子控制下的全長丙肝病毒基因組DNA序列，且在丙肝病毒基因組序列的NS5B編碼區(qū)反方向插入受EMCV的IRES控制的GFP基因序列； b.將步驟a制備的重組載體轉(zhuǎn)染已轉(zhuǎn)染正鏈RNAT7RNA多聚酶基因的細胞株或能表達正鏈RNAT7RNA多聚酶的細胞株； c.篩選GFP和正鏈RNAT7RNA多聚酶雙陽性細胞為轉(zhuǎn)化細胞株； d.在轉(zhuǎn)化細胞株中加入待檢物； e.檢測GFP是否表達。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種在細胞中檢測丙肝病毒RdRp酶的方法，和檢測丙肝病毒RdRp酶所構(gòu)建的載體，以及用載體轉(zhuǎn)化的細胞株及其應(yīng)用。該方法包括制備含指示的重組載體并轉(zhuǎn)染含T7噬菌體RNA多聚酶基因質(zhì)粒的細胞株，通過將檢測物加入已轉(zhuǎn)染的細胞株來檢測丙肝病毒RdRp。該方法可以快速篩選丙肝病毒RdRp的抑制劑，以便開發(fā)抗丙肝病毒的藥物。使用這種方法也可以檢測丙肝病毒RdRp突變體，該突變體可能有助于開發(fā)丙肝病毒疫苗。另外，這種檢測方法可以用來監(jiān)控細胞中丙肝病毒的感染和復(fù)制。它也是一種體外測定丙肝病毒感染滴度的簡單方法。 |
| 國際公布 |
