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中藥肉蓯蓉聚合酶鏈反應(yīng)的鑒定引物序列及其鑒定方法

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1257988C  
公開(kāi)(公告)日 2006.05.31  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200410066785.9  
申請(qǐng)日期 2004.09.29  
專利名稱 中藥蓯蓉聚合酶鏈反應(yīng)的鑒定引物序列及其鑒定方法  
主分類號(hào) C12Q1/68(2006.01)I  
分類號(hào) C12Q1/68(2006.01)I;C12P19/34(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 上海交通大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 李曉波;屠鵬飛;金 鑫;王 敬  
地址 200240上海市閔行區(qū)東川路800號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海交達(dá)專利事務(wù)所  
代理人 王錫麟;王桂忠  
國(guó)省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 一種中藥肉蓯蓉聚合酶鏈反應(yīng)的鑒定引物序列,其特征在于,肉蓯蓉聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的鑒定引物序列為: 引物1:5’-AGAGAGAGAGAGAGAGTC-3’, 引物2:5’-AACTCGTGACAACCACAC-3’。  
摘要 一種中藥肉蓯蓉聚合酶鏈反應(yīng)的鑒定引物序列及其鑒定方法,鑒定引物序列為:引物1:5’-AGA GAG AGA GAG AGA GTC-3’,引物2:5’-AAC TCG TGACAA CCA CAC-3’。具體方法為:藥材DNA的提。喊闯R(guī)方法進(jìn)行,用無(wú)離子水將受試樣品模板DNA濃度調(diào)節(jié)至0.2~0.5ng/μl;鑒別性聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng):反應(yīng)體系以50μl為參考,引物用無(wú)離子水調(diào)至10pmol/μl;鑒定反應(yīng)條件:在基因擴(kuò)增儀上進(jìn)行,94℃預(yù)變性5分鐘,然后進(jìn)行40次循環(huán)反應(yīng);反應(yīng)產(chǎn)物的電泳檢測(cè):取出上述反應(yīng)混和液6~8μl,與2μl加樣緩沖液混合均勻,用2%瓊脂糖凝膠,電壓5v/cm,電泳檢測(cè)擴(kuò)增結(jié)果;若陽(yáng)性,則為正品;若為陰性,則不為正品。本發(fā)明能夠?qū)θ馍惾厮幉哪軌驕?zhǔn)確鑒別其真?zhèn),有益于控制藥材質(zhì)量,同樣適用于海關(guān)檢驗(yàn)等相關(guān)部門的使用。  
國(guó)際公布  
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