公開(kāi)(公告)號(hào)
|
CN1778913A
|
公開(kāi)(公告)日
|
2006.05.31
|
申請(qǐng)(專利)號(hào)
|
CN200410084578.6
|
申請(qǐng)日期
|
2004.11.25
|
專利名稱
|
根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的質(zhì)粒對(duì)頂頭孢霉的轉(zhuǎn)化方法
|
主分類號(hào)
|
C12N15/09(2006.01)I
|
分類號(hào)
|
C12N15/09(2006.01)I;C12N15/80(2006.01)I;C12N15/87(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I
|
分案原申請(qǐng)?zhí)? |
|
優(yōu)先權(quán)
|
|
申請(qǐng)(專利權(quán))人
|
上海醫(yī)藥工業(yè)研究院
|
發(fā)明(設(shè)計(jì))人
|
朱春寶;朱寶泉;徐 威;趙文杰
|
地址
|
200040上海市北京西路1320號(hào)
|
頒證日
|
|
國(guó)際申請(qǐng)
|
|
進(jìn)入國(guó)家日期
|
|
專利代理機(jī)構(gòu)
|
中原信達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司
|
代理人
|
羅大忱
|
國(guó)省代碼
|
上海;31
|
主權(quán)項(xiàng)
|
一種根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的頂頭孢霉的轉(zhuǎn)化方法,包括以下步驟: (1)構(gòu)建重組載體質(zhì)粒; (2)通過(guò)電激法和三親雜交法將載體質(zhì)粒導(dǎo)入根癌農(nóng)桿菌中,構(gòu)建含有雙元載體系統(tǒng)的根癌農(nóng)桿菌; (3)將含有雙元載體系統(tǒng)的根癌農(nóng)桿菌與頂頭孢霉共培養(yǎng),得到轉(zhuǎn)化子; (4)獲得的轉(zhuǎn)化子以耐抗生素進(jìn)行篩選。
|
摘要
|
本發(fā)明涉及根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的頂頭孢霉的轉(zhuǎn)化。本發(fā)明提供了構(gòu)建適用于頭孢菌素C產(chǎn)生菌頂頭孢霉基因工程研究用的新型載體質(zhì)粒,并建立了根癌農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化頂頭孢霉的新方法,無(wú)論是用菌絲體或是原生質(zhì)體,每107個(gè)受體細(xì)胞都可得到>100個(gè)轉(zhuǎn)化子,與傳統(tǒng)的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化法1~4個(gè)轉(zhuǎn)化子相比,轉(zhuǎn)化率得到了明顯的提高。有望突破現(xiàn)有載體轉(zhuǎn)化頂頭孢霉效率率低這一瓶頸,促進(jìn)這個(gè)重要的工業(yè)微生物菌種的基因工程改良,具有極大的工業(yè)價(jià)值。
|
國(guó)際公布
|
|