公開(公告)號(hào)
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CN1252262C
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公開(公告)日
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2006.04.19
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN200310105516.4
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申請(qǐng)日期
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2003.11.14
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專利名稱
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雙啟動(dòng)子DNA疫苗表達(dá)載體pCMVnir及其制備方法
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主分類號(hào)
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C12N15/09(2006.01)I
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分類號(hào)
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C12N15/09(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12N15/31(2006.01)I;C12N15/53(2006.01)I;C12N15/79(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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山東大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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于修平;卞繼峰;趙蔚明;耿 昭;周亞濱;賈繼輝;欒 怡;齊 眉
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地址
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250012山東省濟(jì)南市文化西路44號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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代理人
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國(guó)省代碼
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山東;37
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主權(quán)項(xiàng)
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雙啟動(dòng)子DNA疫苗表達(dá)載體pCMVnir,其特征在于為雙股閉環(huán)DNA分子,是一種基因克隆的載體,長(zhǎng)度為5.1Kb,用于表達(dá)制備基因工程產(chǎn)品和生產(chǎn)DNA疫苗,含有兩種啟動(dòng)子,一種是真核細(xì)胞啟動(dòng)子HCMVIE啟動(dòng)子,另一種為大腸桿菌硝酸鹽還原酶基因啟動(dòng)子nirB,分別在真核細(xì)胞和原核細(xì)胞中被激活表達(dá)相應(yīng)的蛋白,含有多克隆酶切位點(diǎn),用以插入外源基因,該載體具有SEQIDNO1所示的序列 (a)序列特征: 長(zhǎng)度:5144堿基對(duì) 類型:核酸,1323A,1185C,1165G,1471T. 鏈型:雙鏈 拓?fù)浣Y(jié)構(gòu):環(huán)形 (b)分子類型:載體DNA (c)假設(shè):否 (d)反義:否 tcctgcatcttttaatcaaatcccaagatgtgtataaacgcgccggtatgtacaggaaga60 ggtttatactaaactgttacattgcaaacgtggtttcgtgtgccaagtgtgaaaaccgat120 gtttaatcaaggctctgacgcatttctacaaccacgactccaagtgtgtgggtgaagtca180 tgcatcttttaatcaaatcccaagatgtgtataaaccaccaaactgccaaaaaatgaaaa240 ctgtcgacaagctctgtccgtttgctggcaactgcaagggtctcaatcctatttgtaatt300 attgaataataaaacaattataaatgtcaaatttgttttttattaacgatacaaaccaaa360 cgcaacaagaacatttgtagtattatctataattgaaaacgcgtagttataatcgctgag420 gtaatatttaaaatcattttcaaatgattcacagttaatttgcgacaatataattttatt480 ttcacataaactagacgccttgtcgtcttcttcttcgtattccttctctttttcattttt540 ctcttcataaaaattaacatagttattatcgtatccatatatgtatctatcgtatagagt600 aaattttttgttgtcataaatatatatgtcttttttaatggggtgtatagtaccgctgcg660 catagtttttctgtaatttacaacagtgctattttctggtagttcttcggagtgtgttgc720 tttaattattaaatttatataatcaatgaatttgggatcgtcggttttgtacaatatgtt780 gccggcatagtacgcagcttcttctagttcaattacaccattttttagcagcaccggatt840 aacataactttccaaaatgttgtacgaaccgttaaacaaaaacagttcacctcccttttc900 tatactattgtctgcgagcagttgtttgttgttaaaaataacagccattgtaatgagacg960 cacaaactaatatcacaaactggaaatgtctatcaatatatagttgctgatggccggcct1020 attaatagtaatcaattacggggtcattagttcatagcccatatatggagttccgcgtta1080 cataacttacggtaaatggcccgcctggctgaccgcccaacgacccccgcccattgacgt1140 caataatgacgtatgttcccatagtaacgccaatagggactttccattgacgtcaatggg1200 tggagtatttacggtaaactgcccacttggcagtacatcaagtgtatcatatgccaagtc1260 cgccccctattgacgtcaatgacggtaaatggcccgcctggcattatgcccagtacatga1320 ccttacgggactttcctacttggcagtacatctacgtattagtcatcgctattaccatgc1380 tgatgcggttttggcagtacaccaatgggcgtggatagcggtttgactcacggggatttc1440 caagtctccaccccattgacgtcaatgggagtttgttttggcaccaaaatcaacgggact1500 ttccaaaatgtcgtaataaccccgccccgttgacgcaaatgggcggtaggcgtgtacggt1560 gggaggtctatataagcagacgtcgtttagtgaaccgtcagatcactagatgctttattg1620 cggtagtttatcacagttaaattgctaacgccagtctcgaacttaacgtgcagaagttgg1680 tcgtgaggcactgggcaggtaagtatcgggccctttgtgcggggggagcggctcggggct1740 gtccgcggggggacggctgccttcgggggggacggggcagggcggggttcggcttctggc1800 gtgtgaccggcggctctagagcctctgctaaccatgttcatgccttcttctttttcctac1860 agctcctgggcaacgtgctggttattgtgctgtctcatcattttggcaaagaattggatc1920 ggaccgaggtaaatttgatgtacatcaaatggtaccccttgctgaatcgttaaggtaggc1980 ggtagggcccagatcttaatcatccacaggagatataccatggcacaccatcaccaccat2040 cactcttctggtaaagaaaccgctgctgcgaaatttgaacgccagcacatggactcgcca2100 ccgccttctggtctggtcccccggggcagcgcaggttctggtacgattgatgacgacgac2160 aagagtccgggcttctcctcaacgatatctgagctcgtggatccgaattctcagatctcg2220 gcgcgcctgcaggtcgacggtaccggttcgaagcttgcggccgcacagctgtatacacgt2280 gcaagccagccagaactcgccccggaagaccccgaggatctcgagcaccaccatcaccat2340 caccatcactaagtgattaacctcaggtgcaggctgcctatcagaaggtggtggctggtg2400 tggccaatgccctggctcacaaataccactgagatcgatctttttccctctgccaaaaat2460 tatggggacatcatgaagccccttgagcatctgacttctggctaataaaggaaatttatt2520 ttcattgcaatagtgtgttggaattttttgtgtctctcactcggaaggacatatgggagg2580 gcaaatcatttaaaacatcagaatgagtatttggtttagagtttggcaacatatgcccat2640 atgtaactagcataaccccttggggcctctaaacgggtcttgaggggttttttgctgaaa2700 gcatgcggaggaaattctccttgaagtttccctggtgttcaaagtaaaggagtttgcacc2760 agacgcacctctgttcactggtccggcgtattaaaacacgatacattgttattagtacat2820 ttattaagcgctagattctgtgcgttgttgatttacagacaattgttgtacgtattttaa2880 taattcattaaatttataatctttagggtggtatgttagagcgaaaatcaaatgattttc2940 agcgtctttatatctgaatttaaatattaaatcctcaatagatttgtaaaataggtttcg3000 attagtttcaaacaagggttgtttttccgaaccgatggctggactatctaatggattttc3060 gctcaacgccacaaaacttgccaaatcttgtagcag
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摘要
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雙啟動(dòng)子DNA疫苗表達(dá)載體pCMVnir及其制備方法,屬于DNA疫苗技術(shù)領(lǐng)域。雙啟動(dòng)子DNA疫苗表達(dá)載體pCMVnir為雙股閉環(huán)DNA分子,是一種基因克隆的載體,長(zhǎng)度為5.1Kb,用于表達(dá)制備基因工程產(chǎn)品和生產(chǎn)DNA疫苗,含有兩種啟動(dòng)子,一種是真核細(xì)胞啟動(dòng)子HCMV IE啟動(dòng)子,另一種為大腸桿菌硝酸鹽還原酶基因啟動(dòng)子nirB,分別在真核細(xì)胞和原核細(xì)胞中被激活表達(dá)相應(yīng)的蛋白,含有多克隆酶切位點(diǎn),用以插入外源基因,該載體具有SEQ ID NO 1所示的序列。本發(fā)明的疫苗載體可用于高效表達(dá)外源基因,而不需要在培養(yǎng)體系中加入誘導(dǎo)劑。
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國(guó)際公布
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