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一種蛋白酶A抑制劑的提取方法及應(yīng)用

公開(公告)號 CN1303104C  
公開(公告)日 2007.03.07  
申請(專利)號 CN200310106596.5  
申請日期 2003.12.08  
專利名稱 一種蛋白酶A抑制劑的提取方法及應(yīng)用  
主分類號 C07K14/81(2006.01)I  
分類號 C07K14/81(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I;C12C5/02(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 江南大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 田亞平;顧國賢;章克昌;李屹松;周楠迪  
地址 214036江蘇省無錫市惠河路170號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 無錫市大為專利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 時(shí)旭丹  
國省代碼 江蘇;32  
主權(quán)項(xiàng) 一種蛋白酶A抑制劑的分離提取方法,其特征是從靈芝液體深層發(fā)酵的發(fā)酵液中,通過乙醇分級沉淀或膜過濾分級獲得粗蛋白酶A抑制劑;再經(jīng)過分子篩凝膠層析后,收集分子量30KD~40KD部分凍干,即獲得精制蛋白酶A抑制劑;A)靈芝發(fā)酵液的處理:靈芝液體深層發(fā)酵的發(fā)酵液離心除去菌絲體,上清液濃縮2~3倍;B)乙醇分級沉淀或膜過濾分級;對靈芝液體深層發(fā)酵液進(jìn)行乙醇分級沉淀的處理工藝為:發(fā)酵液中先加入乙醇達(dá)30%~50%終濃度,離心后的清液中繼續(xù)加乙醇達(dá)60%~80%終濃度,離心得沉淀,真空冷凍干燥得凍干粉即為粗蛋白酶A抑制劑;或膜過濾分級:利用截留5萬~3萬分子量超濾膜進(jìn)行膜過濾得分子量在3~5萬之間的部分為粗蛋白酶A抑制劑;C)分子篩凝膠層析:采用0.01~0.05mol/L磷酸緩沖液做洗脫劑,洗脫流速為0.5~0.8ml/min,柱尺寸H/D在30~50之間,得精制的蛋白酶A抑制劑。  
摘要 一種蛋白酶A抑制劑的提取方法及應(yīng)用,涉及從靈芝深層發(fā)酵液或靈芝發(fā)酵全粉中提取一種蛋白酶A(PrA)抑制劑及應(yīng)用。從靈芝發(fā)酵液或發(fā)酵全粉的抽提液中通過乙醇分級或膜過濾分級得粗PrA抑制劑,再經(jīng)分子篩層析收集30KD~40KD部分凍干得精制PrA抑制劑。該抑制劑可應(yīng)用于純生啤的生產(chǎn)中。本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)是原料靈芝發(fā)酵液或發(fā)酵全粉可工業(yè)化生產(chǎn),提取工藝簡便、設(shè)備投入少、抑制劑成本低;其應(yīng)用屬于一種后修飾手段,適量添加可提高純生啤酒泡沫穩(wěn)定性,抑制效果高,添加量較為靈活,對啤酒的色度、風(fēng)味、澄清度等品質(zhì)沒有影響;抑制劑成分主要是蛋白質(zhì)、多糖及糖蛋白,其中的高分子多糖不僅對啤酒的泡沫有利,還具一定的保健作用。  
國際公布  
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