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硅殼納米顆粒檢測(cè)SARS病毒基因組片斷的方法

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1285737C  
公開(kāi)(公告)日 2006.11.22  
申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) CN200410046626.2  
申請(qǐng)日期 2004.08.03  
專(zhuān)利名稱 硅殼納米顆粒檢測(cè)SARS病毒基因組片斷的方法  
主分類(lèi)號(hào) C12Q1/68(2006.01)I  
分類(lèi)號(hào) C12Q1/68(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 湖南大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 譚蔚泓;王柯敏;龔 萍;何曉曉  
地址 410082湖南省長(zhǎng)沙市河西岳麓山湖南大學(xué)化學(xué)生物傳感與計(jì)量學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu) 湖南兆弘專(zhuān)利事務(wù)所  
代理人 趙 洪  
國(guó)省代碼 湖南;43  
主權(quán)項(xiàng) 一種硅殼納米顆粒檢測(cè)SARS病毒基因組片斷的方法,其特征在于檢測(cè)的具體過(guò)程為:1)、雜交:連接有5’-TCATAGAGCC TGTGTTGTAG ATTGCGGACA TACTT-Biotin-3’cDNA片斷的硅殼磁性納米探針與含有SARS病毒基因片斷及其它非SARS病毒基因片斷的樣品進(jìn)行雜交;2)、磁分離:利用硅殼磁性納米顆粒的磁性分離作用將SARS病毒基因組從混合樣品中分離和純化出來(lái);3)、PCR擴(kuò)增:以純化的SARS病毒基因組作為模板,通過(guò)一對(duì)特定的引物5’-GATGGTAATA AGATA GCTGA CAAGT-3’和5’-CATCC ACGAA TTCAT GATCA-3’進(jìn)行PCR擴(kuò)增,得到100bp的擴(kuò)增產(chǎn)物;4)、熒光檢測(cè),連接有5’-TCATAGAGCC TGTGTTGTAG ATTGCGGACA TACTT-Biotin-3’cDNA片斷的硅殼熒光納米探針和擴(kuò)增產(chǎn)物以及修飾有5’-Biotin-CATCCACGAATTCATGATCA ACATCCCTAT TTCT-3’cDNA片斷的玻璃芯片以一種類(lèi)似三明治結(jié)構(gòu)的模型進(jìn)行雜交,而后用激光共聚焦熒光顯微鏡對(duì)芯片進(jìn)行掃描檢測(cè)。  
摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種硅殼納米顆粒檢測(cè)SARS病毒基因組片斷的方法,其特點(diǎn)是構(gòu)建了用于SARS病毒檢測(cè)的三明治模型,利用自制的修飾有與SARS病毒基因組特有序列互補(bǔ)的cDNA片斷的硅殼磁性納米探針對(duì)含有SARS病毒基因組的樣本進(jìn)行病毒基因組的提取與純化,再在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR擴(kuò)增)對(duì)病毒基因片斷進(jìn)行擴(kuò)增的基礎(chǔ)上,用修飾有與SARS病毒基因片斷特異序列互補(bǔ)的cDNA片斷的硅殼熒光納米探針及玻璃芯片對(duì)SARS病毒基因片斷進(jìn)行檢測(cè)。本發(fā)明的檢測(cè)方法具有快捷,靈敏度和特異性高,穩(wěn)定性好的優(yōu)點(diǎn)。  
國(guó)際公布  
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