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選擇性滅活腫瘤PLK1抗癌重組腺病毒構(gòu)建體的獲得及用途

公開(公告)號 CN1237177C  
公開(公告)日 2006.01.18  
申請(專利)號 CN03126758.0  
申請日期 2003.06.05  
專利名稱 選擇性滅活腫瘤PLK1抗癌重組腺病毒構(gòu)建體的獲得及用途  
主分類號 C12N15/861(2006.01)I  
分類號 C12N15/861(2006.01)I;C12N7/01(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;C12R1/92(2006.01)N  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 深圳市奧尼克斯基因技術(shù)有限公司  
發(fā)明(設計)人 周劍峰;馬 丁;盧運萍;王世宣;陳 剛;高慶蕾  
地址 518054深圳市南市區(qū)創(chuàng)業(yè)路海王大廈B座15樓C室  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu)  
代理人  
國省代碼 深圳市;44  
主權(quán)項 一種重組腺病毒構(gòu)建體,其技術(shù)特征在于:該構(gòu)建體缺失了V型腺病毒923-931位核苷酸序列cttacctgc,該序列編碼E1A蛋白122至124位基酸,同時,它缺失了V型腺病毒E3區(qū)28532-29360位核苷酸,在該缺失區(qū)域引入一個ClaI酶切位點,并在ClaI酶切位點中插入專利說明書附圖5DNA序列表28560-29328位核苷酸序列,其它基因組結(jié)構(gòu)與野生型V型腺病毒完全相同。  
摘要 本發(fā)明公開了一種人工改造人類5型腺病毒(ADV5)的構(gòu)建方案,以及用該方案獲取的重組腺病毒構(gòu)建體在腫瘤治療中的具體用途。用PCR擴增定點缺失、同源重組、轉(zhuǎn)染、腺病毒單克隆純化等技術(shù),獲得一種重組腺病毒構(gòu)建體,其特征在于:ADV5基因組EIA保守序列2(CR2)編碼序列9個堿基缺失;ADV5E3區(qū)28532-2936O nt缺失;并在該區(qū)域反向插入部分PLK1 cDNA片段。該重組腺病毒構(gòu)建體能選擇性地在腫瘤細胞內(nèi)復制增殖;插入的反義PLK1 cDNA片段在腫瘤細胞內(nèi)特異性表達;對腫瘤細胞具有強效旁觀者效應。從而特異性殺滅腫瘤細胞,同時對正常細胞無殺滅效應。該構(gòu)建體在腫瘤治療藥物、診斷試劑的制備中具有獨特的實用價值,同時也為腫瘤基因治療提供了理想的基因靶點特異性治療應用途徑。  
國際公布  
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