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白細(xì)胞介素-15基因修飾的自然殺傷細(xì)胞株及其制備方法

公開(公告)號(hào) CN1233822C  
公開(公告)日 2005.12.28  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN03152968.2  
申請(qǐng)日期 2003.09.05  
專利名稱 白細(xì)胞介素-15基因修飾的自然殺傷細(xì)胞株及其制備方法  
主分類號(hào) C12N5/08  
分類號(hào) C12N5/08;C12N15/79;C12N15/24;A61K38/20;A61P35/00  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 中國科學(xué)技術(shù)大學(xué);山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 田志剛;張 建;魏海明;張建華;孫 汭  
地址 230026安徽省合肥市金寨路96號(hào)  
頒證日  
國際申請(qǐng)  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 合肥華信專利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 余成俊  
國省代碼 安徽;34  
主權(quán)項(xiàng) 白細(xì)胞介素-15基因修飾的自然殺傷細(xì)胞株,其特征在于保藏號(hào)為CGMCCNo.0996的NK-92/IL-15細(xì)胞株。  
摘要 本發(fā)明公開了一種白細(xì)胞介素-15基因修飾的自然殺傷細(xì)胞株及其制備方法,該細(xì)胞株表型為CD56強(qiáng)陽性,CD16和CD3均為陰性,其形態(tài)為分散的、半貼壁生長狀態(tài)。其制備方法,是將IL-15的cDNA編碼區(qū)插入pcDNA3真核表達(dá)載體,構(gòu)建分泌型重組真核表達(dá)載體pcDNA3/IL-15;利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染NK-92細(xì)胞;在篩選培養(yǎng)基中加入Geneticin(G418)進(jìn)行篩選;有限稀釋克隆化細(xì)胞,以IL-15的依賴細(xì)胞株測定克隆細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-15的活性,從中挑選出表達(dá)IL-15的陽性細(xì)胞克隆;將該克隆在20~100 活性單位的IL-15的完全α-MEM 培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)增,得到具有臨床應(yīng)用價(jià)值的工程細(xì)胞株。適于臨床用于過繼免疫治療腫瘤。  
國際公布  
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