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酵母表達(dá)胸腺肽α1的方法

公開(公告)號(hào) CN1227361C  
公開(公告)日 2005.11.16  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN02136310.2  
申請(qǐng)日期 2002.07.30  
專利名稱 酵母表達(dá)胸腺肽α1的方法  
主分類號(hào) C12N15/16  
分類號(hào) C12N15/16;A61K38/32;A61P37/04;A61P31/12;A61P35/00  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 浙江大學(xué)藥業(yè)有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 陳 智;陳 峰  
地址 310029浙江省杭州市凱旋路268號(hào)  
頒證日  
國際申請(qǐng)  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 浙江杭州金通專利事務(wù)所有限公司  
代理人 吳巧玲  
國省代碼 浙江;33  
主權(quán)項(xiàng) 一種酵母表達(dá)胸腺肽α1的方法,該胸腺肽α1可用于因胸腺功能低下而造成的疾病的輔助治療,其特征是該方法包括下列步驟:(1)以合成的胸腺肽α1為模板,設(shè)計(jì)5’GGAAGCTTACCATGGGCTCTGATGCTGCTGTTG3’上游引物和5’TATCTAGATTATGGATCCTAGTTCTCAGC3’下游引物,并在引物上引入HindIII酶切位點(diǎn)和BamHI酶切位點(diǎn),通過PCR擴(kuò)增法,得到含HindIII酶切位點(diǎn)和BamHI酶切位點(diǎn)的胸腺肽α1全長(zhǎng)基因;(2)以HindIII酶和BamHI酶對(duì)胸腺肽α1PCR產(chǎn)物和pYES2質(zhì)粒進(jìn)行酶切,將雙酶切后的胸腺肽α1PCR產(chǎn)物和pYES2質(zhì)粒在T4連接酶作用下作連接反應(yīng),獲得胸腺肽α1重組體;(3)將獲得的胸腺肽α1重組體轉(zhuǎn)化至啤酵母中,使其穩(wěn)定表達(dá)人胸腺肽α1蛋白。  
摘要 一種酵母表達(dá)胸腺肽α1的方法,是用PCR法擴(kuò)增得到含HindⅢ酶切位點(diǎn)和BamHⅠ酶切位點(diǎn)的胸腺肽α1全長(zhǎng)基因,經(jīng)兩端內(nèi)切酶HindⅢ酶和BamHⅠ酶酶切后克隆至啤酒酵母中穩(wěn)定表達(dá),其表達(dá)的胸腺肽α1具有真核細(xì)胞的修飾基團(tuán),與人體內(nèi)表達(dá)的胸腺肽α1結(jié)構(gòu)一致,具有極好的生物學(xué)活性,可用于治療腫瘤,抗病毒及免疫缺陷病人的輔助治療及因胸腺功能低下而造成的疾病的輔助治療,也可作為疫苗增強(qiáng)劑使用。還可直接口服,可用于口服制劑的開發(fā)。  
國際公布  
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