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從新的融合蛋白制造重組胰島素的方法

公開(公告)號(hào) CN1213146C  
公開(公告)日 2005.08.03  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN00806934.4  
申請(qǐng)日期 2000.04.26  
專利名稱 從新的融合蛋白制造重組胰島素的方法  
主分類號(hào) C12N15/17  
分類號(hào) C12N15/17;C12N15/03;C07K19/00;C07K14/575  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 1999.4.30 JP 124877/1999  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 伊藤火腿株式會(huì)社  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 岡周作;佐藤靜治;東久邇真彥;近藤雅昭;;工藤季之;渡邊重明;脅能宏;結(jié)城寬孝  
地址 日本兵庫  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng) PCT/JP2000/002736 2000.4.26  
進(jìn)入國(guó)家日期 2001.10.30  
專利代理機(jī)構(gòu) 中原信達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司  
代理人 丁業(yè)平;王維玉  
國(guó)省代碼 日本;JP  
主權(quán)項(xiàng) 編碼下式(I)所示融合蛋白的DNA:[Y]-[X1]-[B-鏈]-[X2]-[連接物]-[X3]-[A-鏈](式I)其中Y是用于蛋白質(zhì)的表達(dá)和分泌的引導(dǎo)肽序列,包含來自芽孢桿菌屬細(xì)菌的細(xì)胞壁蛋白(CWP)之一的MWP蛋白的N末端的9個(gè)基酸殘基;X1是可用凝血酶酶切的氨基酸序列;B-鏈?zhǔn)且葝u素B鏈的氨基酸序列;X2是可用凝血酶酶切的氨基酸序列;連接物是具有至少一個(gè)氨基酸殘基的連接序列;X3是可用凝血酶酶切的氨基酸序列;以及A-鏈?zhǔn)且葝u素A鏈的氨基酸序列;并且Y、X1、B-鏈、X2、連接物、X3和A-鏈按照式I所示的順序連接。  
摘要 本發(fā)明公開了編碼下式(I)所示融合蛋白的DNA以及采用含有該DNA的表達(dá)體系生產(chǎn)胰島素的方法,所述融合蛋白含有:用于蛋白質(zhì)的表達(dá)和分泌的包含至少一個(gè)氨基酸殘基的引導(dǎo)肽序列[Y]、被用來酶切或者化學(xué)裂解的氨基酸序列[X1]、胰島素B鏈的氨基酸序列[B-鏈]、被用來酶切的氨基酸序列[X2]、具有至少一個(gè)氨基酸殘基的連接序列[連接物]、被用來酶切的氨基酸序列[X3]以及胰島素A鏈的氨基酸序列[A-鏈]并且他們的連接順序?yàn)閇Y]-[X1]-[B-鏈]-[X2]-[連接物]-[X3]-[A-鏈](式I)。因此提供了可高生產(chǎn)率地生產(chǎn)基因重組胰島素的方法。  
國(guó)際公布 WO2000/066738 日 2000.11.9  
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