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用于檢測副溶血弧菌的耐熱性溶血素相關(guān)溶血素基因的檢測試劑

公開(公告)號 CN1637152A  
公開(公告)日 2005.07.13  
申請(專利)號 CN200410090525.5  
申請日期 2004.09.03  
專利名稱 用于檢測副溶血弧菌的耐熱性溶血素相關(guān)溶血素基因的檢測試劑  
主分類號 C12Q1/68  
分類號 C12Q1/68  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2003.9.5 JP 314142/2003  
申請(專利權(quán))人 東曹株式會社  
發(fā)明(設計)人 益田升佳;堀江隆一;保川清  
地址 日本山口縣  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 北京市中咨律師事務所  
代理人 黃革生;隗永良  
國省代碼 日本;JP  
主權(quán)項 一種用于檢測樣品中存在的副溶血弧菌耐熱性溶血素相關(guān)溶血素(TRH)基因的檢測試劑,該檢測試劑被用于使用RNA擴增程序的檢測方法中,所述RNA擴增程序包括以下步驟:以一段來自所述TRH基因的RNA的特定序列作為模板,通過RNA依賴性DNA聚合酶,應用具有與所述特定序列互補的序列的第一引物和具有與所述特定序列同源的序列的第二引物,生成cDNA,由此形成雙鏈RNA-DNA,其中第一引物或第二引物在其5’末端添加了RNA聚合酶的啟動子序列;通過核糖核酸酶H降解所述雙鏈RNA-DNA中的RNA部分,從而生成單鏈DNA;和以所述的單鏈DNA作為模板,通過DNA依賴性DNA聚合酶,合成具有所述啟動子序列的雙鏈DNA,其中所述雙鏈DNA能轉(zhuǎn)錄為由所述特定RNA序列或者所述特定RNA序列的互補序列組成的RNA;其中,該雙鏈DNA在RNA聚合酶的作用下生成RNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,所述RNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物作為模板用于隨后通過RNA依賴性DNA聚合酶合成cDNA;所述的試劑包括,第一引物,其是由SEQ.IDNo.2所示序列的至少10個連續(xù)堿基組成的寡核苷酸,或者是從SEQ.IDNo.2所示序列的至少10個連續(xù)堿基組成的寡核苷酸中缺失、替換或添加一個或多個核苷酸后能特異性結(jié)合到所述特定序列上的寡核苷酸;和第二引物,其是由SEQ.IDNo.1所示序列的至少10個連續(xù)堿基組成的寡核苷酸,或者是從SEQ.IDNo.1所示序列的至少10個連續(xù)堿基組成的寡核苷酸中缺失、替換或添加一個或多個核苷酸后能特異性結(jié)合到所述特定序列的互補序列上的寡核苷酸。  
摘要 本發(fā)明涉及一種檢測試劑,其用于在特異性擴增TRH1和TRH2 RNA的擴增程序中檢測耐熱性溶血素相關(guān)溶血素(TRH)基因,該試劑包括具有與來自TRH基因的RNA的特定序列互補的序列的第一引物,以及具有與所述特定序列同源的序列的第二引物。  
國際公布  
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