| 公開(公告)號 | CN1195062C |
| 公開(公告)日 | 2005.03.30 |
| 申請(專利)號 | CN03100415.6 |
| 申請日期 | 2003.01.13 |
| 專利名稱 | 非抗生素抗性穿梭質粒表達載體及其構建方法和應用 |
| 主分類號 | C12N15/64 |
| 分類號 | C12N15/64;C12N15/65;C12N15/74;C12N15/70;C12N1/21;A23C9/123;A61K35/74;A23K1/16;A61P1/00 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 王春鳳;孫哲 |
| 發(fā)明(設計)人 | 王春鳳;秦澤榮;孫哲;劉尚高 |
| 地址 | 130118 吉林省長春市南關區(qū)南環(huán)路東吉林農(nóng)業(yè)大學動物科技學院 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 長春科宇專利代理有限責任公司 |
| 代理人 | 李恩慶 |
| 國省代碼 | 吉林;22 |
| 主權項 | 一種非抗生素抗性穿梭質粒表達載體，其特征是：首先，對原始質粒表達載體pMG26e用限制性內切酶進行酶切；其次，針對原始質粒表達載體pMG26e多克隆酶切位點情況，設計特定連接末端擴增非抗生素抗性選擇基因NASG；再次，將擴增得到的非抗生素抗性選擇基因NASG連接到特定位置；最后，用限制性內切酶徹底去除原始質粒載體pMG26e中的抗生素紅霉素基因并環(huán)化得到質粒載體pMG425t；pMG425t不含有抗生素抗性基因，在革藍氏陽性細菌和革藍氏陰行細菌之間穿梭表達成為質粒表達載體。 |
| 摘要 | 本發(fā)明屬于生物工程技術領域，是一種非抗生素抗性穿梭質粒表達載體及構建方法和應用。本發(fā)明是把基本質粒載體pMG36e，經(jīng)限制性內切酶EcoR I在其酶切位點上酶切，成為線型。在近紅霉素Er端連接非抗生素抗性基因，之后環(huán)化回環(huán)狀。再在這個環(huán)上把紅霉素基因Er用內切酶去除，形成非抗生素抗性穿梭表達質粒載體。將人或動物疾病的保護性抗原基因連接入本發(fā)明的非抗生素抗性質粒載體，可以制造功能性食品，對特定疾病具有預防、保護作用的細菌懸液、口服補劑、管飼產(chǎn)品以及動物性疫苗。本發(fā)明用非抗生素可行基因替代紅霉素基因，在使用過程中不存在抗生素抗性基因擴散的問題，避免通過質粒載體的轉移而引起的抗生素抗性基因擴散問題。 |
| 國際公布 |
