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對肝細(xì)胞具有專一親和性的融合蛋白及其核苷酸順序

公開(公告)號 CN1191277C  
公開(公告)日 2005.03.02  
申請(專利)號 CN97125211.4  
申請日期 1997.12.30  
專利名稱 對肝細(xì)胞具有專一親和性的融合蛋白及其核苷酸順序  
主分類號 C07K19/00  
分類號 C07K19/00;C12N15/62  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 中國科學(xué)院上海生物工程研究中心  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 陳常慶;陳波  
地址 200233 上海市漕寶路500號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海專利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 徐迅  
國省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 一種對肝細(xì)胞具有專一親和性的融合蛋白,其特征在于是將乙型肝炎病毒表面抗原蛋白與人腫瘤壞死因子hTNFα相融合的蛋白。  
摘要 乙型肝炎病毒表面抗原preS1蛋白參與乙肝病毒與肝細(xì)胞受體的結(jié)合,同時(shí)也含有B細(xì)胞和T細(xì)胞的抗原決定簇,我們用PCR法合成了HBsAg preS1(1-65)肽段基因,將該基因融合在毒素蛋白基因(腫瘤壞死因子)之后,插入表達(dá)載體中,使融合基因的5’端直接置于大腸肝菌P1啟動子下游,經(jīng)培養(yǎng)誘導(dǎo),獲得了毒素蛋白與preS1(1-65)融合蛋白的表達(dá)產(chǎn)物,以人腫瘤壞死因子(hTNFα)為例,SDS-PAGE電泳顯示表達(dá)產(chǎn)物為25KD,約占細(xì)菌總蛋白的35%。表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)Wertern-blot驗(yàn)證,能分別特異地與hTNFα抗體與preSI抗體結(jié)合,稀釋復(fù)性后,該融合蛋白還具有TNF的生理功能(對L-929細(xì)胞的細(xì)胞毒活性)經(jīng)DNA序列測定,preS1(1-65)肽基因正確地融合在hTBFα基因之后。  
國際公布  
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