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一種檢測(cè)變異基因的PCR方法

公開(公告)號(hào) CN1580279A  
公開(公告)日 2005.02.16  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN03141987.9  
申請(qǐng)日期 2003.07.31  
專利名稱 一種檢測(cè)變異基因的PCR方法  
主分類號(hào) C12Q1/68  
分類號(hào) C12Q1/68;C12P19/34  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 徐定邦;徐文慧  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 徐定邦;朱德芬;程光勝;徐文慧  
地址 200071上海市永興路58弄2號(hào)603室  
頒證日  
國際申請(qǐng)  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu)  
代理人  
國省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 本發(fā)明提供一種檢測(cè)變異序列的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法,其步驟依次包括:(1)DNA模板變性解鏈;(2)引物與模板退火;(3)在DNA聚合酶催化下延伸合成互補(bǔ)DNA鏈;按步驟(1)-(3)循環(huán)進(jìn)行合成反應(yīng),其特征在于在PCR反應(yīng)的起初1-10個(gè)循環(huán)中有一個(gè)循環(huán)的退火溫度比其他循環(huán)低5-40℃。  
摘要 本發(fā)明提供一種檢測(cè)變異基因的PCR方法,通過選擇保守引物和可變引物以及應(yīng)用特定的擴(kuò)增程序,即起初1-10個(gè)循環(huán)中有一個(gè)循環(huán)的退火溫度比其他循環(huán)低5-40℃的方法,使PCR能在既擴(kuò)增各種變異模板的同時(shí)又保持?jǐn)U增的高度專一,解決了現(xiàn)有方法難以同時(shí)滿足擴(kuò)增專一性和檢測(cè)假陰性的問題,適合多變異的基因序列模板的擴(kuò)增反應(yīng),特別是病毒基因的檢測(cè)。  
國際公布  
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