公開(公告)號(hào)
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CN1184314C
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公開(公告)日
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2005.01.12
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN00115408.7
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申請(qǐng)日期
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2000.04.18
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專利名稱
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中國(guó)人共刺激信號(hào)抑制因子的基因工程制備方法
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主分類號(hào)
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C12N15/09
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分類號(hào)
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C12N15/09;C12N15/12;C12N15/79;C12N15/81;C12N15/70;A61P37/02;A61P37/06;C12Q1/68
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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復(fù)旦大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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朱乃碩
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地址
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200433 上海市邯鄲路220號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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上海正旦專利代理有限公司
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代理人
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姚靜芳
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國(guó)省代碼
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上海;31
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主權(quán)項(xiàng)
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一種中國(guó)人共刺激信號(hào)抑制因子的基因工程制備方法,通過基因分離、克隆、表達(dá)過程,其特征是該方法包括如下步驟:(1)在酵母中克隆基因,并根據(jù)圖4第三行序列所示的中國(guó)人共刺激信號(hào)抑制因子基因序列,利用宿主優(yōu)勢(shì)密碼子設(shè)計(jì)克隆引物進(jìn)行核苷酸序列改造:序列第9位G改為T,第12位C改為T,第15位G改為A,第18位T改為A;克隆出改造后的中國(guó)人共刺激信號(hào)抑制因子活性蛋白編碼序列;(2)由(1)克隆出的序列構(gòu)建酵母轉(zhuǎn)化質(zhì)粒pPICLA;(3)轉(zhuǎn)化宿主菌:以pPICLA轉(zhuǎn)化酵母宿主菌;(4)培養(yǎng)(3)中轉(zhuǎn)化的宿主菌,表達(dá)并獲得中國(guó)人共刺激信號(hào)抑制因子活性多肽。
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摘要
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本發(fā)明涉及基因工程領(lǐng)域。本發(fā)明提供了一種中國(guó)人共刺激信號(hào)抑制因子的基因工程制備方法。目前有關(guān)細(xì)胞毒性T細(xì)胞相關(guān)抗原4(共刺激信號(hào)負(fù)調(diào)控分子)的生物學(xué)研究及基因工程蛋白更適合外國(guó)人。本發(fā)明對(duì)中國(guó)人細(xì)胞毒性T細(xì)胞相關(guān)抗原4基因DNA密碼子進(jìn)行改造,采用宿主優(yōu)勢(shì)密碼子,構(gòu)建表達(dá)載體系列,適合在真核生物和原核生物中表達(dá)。經(jīng)鑒定,獲得了具有表達(dá)中國(guó)人共刺激信號(hào)抑制因子的蛋白分子。該基因工程蛋白分子更適合于中國(guó)人,而且能大量生產(chǎn),是一種前景廣闊的生物工程免疫耐受誘導(dǎo)劑。
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國(guó)際公布
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