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中國(guó)人共刺激信號(hào)抑制因子的基因工程制備方法

公開(公告)號(hào) CN1184314C  
公開(公告)日 2005.01.12  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN00115408.7  
申請(qǐng)日期 2000.04.18  
專利名稱 中國(guó)人共刺激信號(hào)抑制因子的基因工程制備方法  
主分類號(hào) C12N15/09  
分類號(hào) C12N15/09;C12N15/12;C12N15/79;C12N15/81;C12N15/70;A61P37/02;A61P37/06;C12Q1/68  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 復(fù)旦大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 朱乃碩  
地址 200433 上海市邯鄲路220號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海正旦專利代理有限公司  
代理人 姚靜芳  
國(guó)省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 一種中國(guó)人共刺激信號(hào)抑制因子的基因工程制備方法,通過基因分離、克隆、表達(dá)過程,其特征是該方法包括如下步驟:(1)在酵母中克隆基因,并根據(jù)圖4第三行序列所示的中國(guó)人共刺激信號(hào)抑制因子基因序列,利用宿主優(yōu)勢(shì)密碼子設(shè)計(jì)克隆引物進(jìn)行核苷酸序列改造:序列第9位G改為T,第12位C改為T,第15位G改為A,第18位T改為A;克隆出改造后的中國(guó)人共刺激信號(hào)抑制因子活性蛋白編碼序列;(2)由(1)克隆出的序列構(gòu)建酵母轉(zhuǎn)化質(zhì)粒pPICLA;(3)轉(zhuǎn)化宿主菌:以pPICLA轉(zhuǎn)化酵母宿主菌;(4)培養(yǎng)(3)中轉(zhuǎn)化的宿主菌,表達(dá)并獲得中國(guó)人共刺激信號(hào)抑制因子活性多肽。  
摘要 本發(fā)明涉及基因工程領(lǐng)域。本發(fā)明提供了一種中國(guó)人共刺激信號(hào)抑制因子的基因工程制備方法。目前有關(guān)細(xì)胞毒性T細(xì)胞相關(guān)抗原4(共刺激信號(hào)負(fù)調(diào)控分子)的生物學(xué)研究及基因工程蛋白更適合外國(guó)人。本發(fā)明對(duì)中國(guó)人細(xì)胞毒性T細(xì)胞相關(guān)抗原4基因DNA密碼子進(jìn)行改造,采用宿主優(yōu)勢(shì)密碼子,構(gòu)建表達(dá)載體系列,適合在真核生物和原核生物中表達(dá)。經(jīng)鑒定,獲得了具有表達(dá)中國(guó)人共刺激信號(hào)抑制因子的蛋白分子。該基因工程蛋白分子更適合于中國(guó)人,而且能大量生產(chǎn),是一種前景廣闊的生物工程免疫耐受誘導(dǎo)劑。  
國(guó)際公布  
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