公開(公告)號(hào)
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CN1181195C
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公開(公告)日
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2004.12.22
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN02145492.2
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申請(qǐng)日期
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2002.11.20
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專利名稱
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一種人外周血血管內(nèi)皮祖細(xì)胞的培養(yǎng)方法
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主分類號(hào)
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C12N5/08
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分類號(hào)
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C12N5/08;C12Q1/02;C12Q1/68
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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上海市第一人民醫(yī)院
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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孫寶貴;嚴(yán)軼文;戴秋艷
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地址
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200080 上海市武進(jìn)路85號(hào)
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頒證日
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國際申請(qǐng)
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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上海正旦專利代理有限公司
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代理人
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包兆宜
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國省代碼
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上海;31
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主權(quán)項(xiàng)
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一種人外周血血管內(nèi)皮祖細(xì)胞的培養(yǎng)方法,其特征在于分離人外周血單個(gè)核細(xì)胞,通過體外直接培養(yǎng)后,得到血管內(nèi)皮祖細(xì)胞,包括下述步驟:1)分離人外周血單個(gè)核細(xì)胞:取人股動(dòng)脈抗凝血10-15ml,用Ficoll密度梯度離心法分離出單個(gè)核細(xì)胞;
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摘要
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本發(fā)明屬生物細(xì)胞技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種人外周血血管內(nèi)皮祖細(xì)胞的培養(yǎng)方法。本發(fā)明直接用MNC細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)以獲得EPCs,在培養(yǎng)液中加入生長(zhǎng)因子,以一定的種植密度植于用明膠包被的培養(yǎng)瓶中或小玻片上,進(jìn)行常規(guī)培養(yǎng)獲得ECPs。本發(fā)明簡(jiǎn)化了傳統(tǒng)培養(yǎng)方法的步驟,有效的避免MNC CD34+的不必要損失,提高EPCs的得率,可重復(fù)性高,并節(jié)省大量的經(jīng)費(fèi)。本發(fā)明方法為人外周血EPCs的分離和培養(yǎng)建立了方法學(xué),為今后臨床應(yīng)用做準(zhǔn)備,能相應(yīng)減少外周血的用量,為自體回輸治療缺血性疾病創(chuàng)造條件。
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國際公布
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