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聚苯乙烯微球檢測流行性感冒病毒核酸的方法

公開(公告)號 CN1554775A  
公開(公告)日 2004.12.15  
申請(專利)號 CN200310122907.7  
申請日期 2003.12.24  
專利名稱 聚苯乙烯微球檢測流行性感冒病毒核酸的方法  
主分類號 C12Q1/68  
分類號 C12Q1/68  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 浙江大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計)人 陳 智;朱海紅  
地址 310027浙江省杭州市西湖區(qū)浙大路38號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 杭州求是專利事務(wù)所有限公司  
代理人 趙杭麗;張法高  
國省代碼 浙江;33  
主權(quán)項(xiàng) 聚苯乙烯微球檢測流行性感冒病毒核酸的方法,其特征是:將流行性感冒病毒的特異性核酸探針交聯(lián)在聚苯乙烯微球上,與被測標(biāo)本反應(yīng)后,再與熒光素標(biāo)記的報告分子反應(yīng),通過熒光檢測儀檢測流行性感冒病毒的特異性核酸。SEQIDNO:1為根據(jù)甲型流感病毒的代表株A/PR/8/34(HON1)的片斷4和片斷5的序列分別設(shè)計和合成各3條探針的核酸序列,6條探針等量混合后標(biāo)記微球體A:(A1)5’-TTTAAATAAAAAAGTTGATGATGGATTTCTGGACATTTGG-3’(A2)5’-ATGAATGCATGGAAAGTGTAAGAAATGGGACTTATGATTA-3’(A3)5’-GGCAATCAGTTTCTGGATGTGTTCTAATGGATCTTTGCAG-3’(A4)5’-ATGAAAGAATGTGCAACATTCTCAAAGGGAAATTTCAAAC-3’(A5)5’-TCATAAGGATGATGGAAAGTGCAAGACCAGAAGATGTGTC-3’(A6)5’-AAAAGGCAGCGAGCCCGATCGTGCCTTCCTTTGACATGAG-3’SEQIDNO:2為根據(jù)乙型流感病毒的代表株B/Lee/40的片斷4和片斷5的序列分別設(shè)計和合成各3條探針的核酸序列,6條探針等量混合后標(biāo)記微球體B:(B1)5’-ATCAATACAGAGACGGCACCAGGAGGACCCTACAAGGTGG-3’(B2)5’-ATCCTCAAAAGTTCACCTCATCTGCCAATGGAGTAACCAC-3’(B3)5’-GCAAGTGGCAGGAGCAAGGTAATAAAAGGGTCCTTGCCTT-3’(B4)5’-TTTAAAAGAAGAGGTGAAAACAATGTACAAGACCACCATG-3’(B5)5’-GCCCTGTGTTTGCAGTAGAAAGACCTATTGCTCTAAGCAA-3’(B6)5’-GAGGGACACAGCAGAGGATTATGATGACCTCGATTATTAA-3’SEQIDNO:3為根據(jù)丙型流感病毒(InfluenzaCvirus)的代表株C/California/78株的片斷7和C/Hyogo/1/83株的M蛋白的序列分別設(shè)計和合成各3條探針的核酸序列,6條探針等量混合后標(biāo)記微球體C:(C1)5’-TCCAAATCCTTCACGTATGAGATTGAGCTATGCATTTGTT-3’(C2)5’-ATTGAAACAGGAATTAGAAAATGTTTCAGATGCATTAAAA-3’(C3)5’-GAGCCCAGCTCGATCCCTATTGGGAAATGAAACACCAGAT-3’(C4)5’-GCAAGCGACATGCTGAATAAAGCAACTTCTAGTTTGAAAA-3’(C5)5’-ACGAAATTGCTGGTATTACTGGCCTTGGAGAAGAAGCACT-3’(C6)5’-TATAATGAGACCCCACTTGGAAAAAGCAATAAAAGGAGTT-3’SEQIDNO:4為根據(jù)甲型流感病毒的代表株A/PR/8/34(HON1)的片斷4和片斷5的序列分別設(shè)計和合成各3條寡核酸的序列,等量混合后,標(biāo)記上生物素。(A1R)5’-ACATATAATGCAGAATTGTTAGTTCTACTG-3’(A2R)5’-TCCCAAATATTCAGAAGAGTCAAAGTTGAA-3’(A3R)5’-TGCAGAATATGCATCTGAGATTAGAATTTC-3’(A4R)5’-TGCTGCACAAAAAGCAATGATGGATCAAGT-3’(A5R)5’-TTTCCAGGGGCGGGGAGTCTTCGAGCTCTC-3’(A6R)5’-TAATGAAGGATCTTATTTCTTCGGAGACAA-3’SEQIDNO:5為根據(jù)乙型流感病毒的代表株B/Lee/40的片斷4和片斷5的序列分別設(shè)計和合成各3條寡核酸寡核酸針,等量混合后,標(biāo)記上生物素。(B1R)5’-GGACCTCAGGATCTTGCCCTAACGTTGCTA-3’(B2R)5’-ACATTATGTTTCTCAGATTGGTGGCTTCCC-3’(B3R)5’-TAATTGGTGAAGCAGATTGCCTCCACGAAA-3’(B4R)5’-GGGAGTGATGGTTTCAGTGGACTAAATCAC-3’(B5R)5’-GCAAGCTGTAAGAAGAATGCTGTCAATGAA-3’(B6R)5’-AGCAATAAAATAGACACTATGGCTGTGACT-3’SEQIDNO:6為根據(jù)丙型流感病毒的代表株C/California/78株的片斷7和C/Hyogo/1/83株的M蛋白的序列分別設(shè)計和合成各3條寡核酸,等量混合后,標(biāo)記上生物素。(C1R)5’-TTGTATTGCAGAAATACTAAGAAGATCTGT-3’(C2R)5’-GCGGATTCGTTATGGCTACCGATGAAATCT-3’(C3R)5’-ATTGACAAGACTGAAGCTTATATGCTCTCG-3’(C4R)5’-AATCAGAAGGAAGAGACATCAGAAAGCAAA-3’(C5R)5’-ATCTCTCCAAAGACAAACAGAAAGTTTGGC-3’(C6R)5’-GAAGGCAGAGTTGGAGAGATGGGACGAATG-3’  
摘要 聚苯乙烯微球檢測流行性感冒病毒核酸的方法,是將流行性感冒病毒(influenza virus)的特異性核酸探針交聯(lián)在聚苯乙烯微球上,與被測標(biāo)本反應(yīng)后,再與熒光素標(biāo)記的報告分子反應(yīng),通過熒光檢測儀檢測流行性感冒病毒的特異性核酸方法。本發(fā)明的檢測方法結(jié)果精確、可靠、假陽性率低、快速,適用于臨床檢測流行性感冒病毒的核酸,以指導(dǎo)流行性感冒的預(yù)防和控制工作。  
國際公布  
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