網(wǎng)站首頁
醫(yī)師
藥師
護士
衛(wèi)生資格
高級職稱
住院醫(yī)師
畜牧獸醫(yī)
醫(yī)學考研
醫(yī)學論文
醫(yī)學會議
考試寶典
網(wǎng)校
論壇
招聘
最新更新
網(wǎng)站地圖
您現(xiàn)在的位置: 醫(yī)學全在線 >> 藥學理論 >> 中國藥品專利文獻 >> 正文:含CpGDNA畜禽疫苗佐劑的PCR制備方法專利檢索:專利號/專利人/發(fā)明人
    

含CpGDNA畜禽疫苗佐劑的PCR制備方法

公開(公告)號 CN1554770A  
公開(公告)日 2004.12.15  
申請(專利)號 CN200310106227.6  
申請日期 2003.11.07  
專利名稱 含CpG DNA畜禽疫苗佐劑的PCR制備方法  
主分類號 C12P19/34  
分類號 C12P19/34;A61K39/39  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 深圳市未來海洋科技發(fā)展有限公司  
發(fā)明(設(shè)計)人 朱鴻飛;李光富  
地址 210096廣東省深圳市中心區(qū)福中一路江蘇大廈30樓45號信箱  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 南京經(jīng)緯專利商標代理有限公司  
代理人 王之梓  
國省代碼 廣東;44  
主權(quán)項 一種能促進畜禽疫苗效價的含CpGDNA畜禽疫苗佐劑的PCR制備方法,其特征在于:第一步:基因工程重組質(zhì)粒的制備:根據(jù)由序列為:5’----GGTGCATCGATGCAGGGGGG---3’、5’----GGTGCGTCGATGCAGGGGGG---3’及5’---TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT---3’串聯(lián)而成的D19D282006目的片段DNA的序列,合成其寡核苷酸正鏈和負鏈,在合成的寡核苷酸末端加上能與線性載體末端相匹配的堿基序列,然后將此寡核苷酸片段、退火緩沖液、及無菌重蒸水混合后,于90℃~100℃水浴中孵浴3分鐘以上,自然冷卻至室溫,形成含CpG基序的目的片段,此后將此DNA片段插入線性載體的相應(yīng)的酶切位點,最后,將其轉(zhuǎn)化感受態(tài)大腸桿菌而得到的基因工程重組質(zhì)粒;第二步:根據(jù)目的片段兩端的重組質(zhì)粒DNA序列,設(shè)計特異引物;第三步:以重組質(zhì)粒為模板,加入特異引物,并進行三溫循環(huán)的PCR擴增,具體參數(shù)為:92℃~98℃預(yù)變性5~10分鐘;92℃~98℃,45~60秒,50~58℃,45~60秒,72℃,45~60秒,進行30~35個循環(huán);最后在72℃延伸10分鐘。  
摘要 含CpG DNA畜禽疫苗佐劑的PCR制備方法,據(jù)由序列為:5’-GGTGCATCGATGCAGGGGGG-3’、5’-GGTGCGTCGATGCAGGGGGG-3’及5’-TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT-3’串聯(lián)而成的D19D282006 DNA片段的序列,合成其正鏈和負鏈,在合成的寡核苷酸末端加能與載體末端匹配的堿基,將此寡核苷酸片段、退火緩沖液、無菌重蒸水混合后,于90℃~100℃水浴中3分鐘以上,冷卻至室溫,形成含CpG基序的目的片段,將DNA片段插入載體相應(yīng)的酶切位點,并將其轉(zhuǎn)化感受態(tài)大腸桿菌得到重組質(zhì)粒;據(jù)目的片段兩端的重組質(zhì)粒DNA序列,設(shè)計特異引物;以重組質(zhì)粒為模板,加入特異引物,進行三溫循環(huán)PCR擴增,具體參數(shù)為:92℃~98℃預(yù)變性5~10分鐘;92℃~98℃,45~60秒,50~58℃,45~60秒,72℃,45~60秒,進行30~35個循環(huán);最后在72℃延伸10分鐘。  
國際公布  
...
評論加載中...
網(wǎng) 名: (必填項)
評論內(nèi)容:
關(guān)于我們 - 聯(lián)系我們 -版權(quán)申明 -誠聘英才 - 網(wǎng)站地圖 - 醫(yī)學論壇 - 醫(yī)學博客 - 網(wǎng)絡(luò)課程 - 幫助
醫(yī)學全在線 版權(quán)所有© CopyRight 2006-2046, MED126.COM, All Rights Reserved
浙ICP備12017320號-1
百度大聯(lián)盟認證綠色會員可信網(wǎng)站 中網(wǎng)驗證