| 公開(公告)號 | CN1154717C |
| 公開(公告)日 | 2004.06.23 |
| 申請(專利)號 | CN96199175.5 |
| 申請日期 | 1996.12.19 |
| 專利名稱 | 改良無限增殖化人類皮膚細胞系和用于其生產(chǎn)的新型無血清培育基 |
| 主分類號 | C12N5/08 |
| 分類號 | C12N5/08;C12N5/00;C12N5/22 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | 1995.12.21 US 08/576,483 |
| 申請(專利權)人 | 雀巢制品公司 |
| 發(fā)明(設計)人 | M·鮑爾;C·馬斯;A·馬爾諾伊 |
| 地址 | 瑞士沃韋 |
| 頒證日 | 2004.06.23 |
| 國際申請 | PCT/EP1996/005812 1996.12.19 |
| 進入國家日期 | 1998.06.19 |
| 專利代理機構(gòu) | 中國專利代理(香港)有限公司 |
| 代理人 | 齊曾度 |
| 國省代碼 | 瑞士;CH |
| 主權項 | 無限增殖化人皮膚細胞以獲得無限增殖化角化細胞和黑素細胞的改良方法，包括以下步驟：(i)獲取人皮膚組織樣本；(ii)制備用于體外培養(yǎng)的所述皮膚樣本；(iii)從所述制備的皮膚樣本中獲取角化細胞和/或黑素細胞，將這些角化細胞和/或黑素細胞接種到備有外被層的培養(yǎng)皿上的無血清生長培養(yǎng)基中，該外被層包含纖維粘連蛋白、I型膠原蛋白和BSA，該外被層促進細胞附著和生長；(iv)必要時更換培養(yǎng)基，以使培養(yǎng)細胞的鋪滿生長達到最佳化，同時在培養(yǎng)皿上連續(xù)保持該外被層；(v)將角化細胞或黑素細胞轉(zhuǎn)移到同樣預鋪外被層的培養(yǎng)皿上的無血清選擇培養(yǎng)基；(vi)用逆轉(zhuǎn)錄病毒構(gòu)建體感染角化細胞或黑素細胞；(vii)將產(chǎn)生的無限增殖化角化細胞或黑素細胞轉(zhuǎn)移到同樣預鋪外被層的培養(yǎng)皿上的無血清增殖培養(yǎng)基上，這種培養(yǎng)基適用于無限增殖化角化細胞或黑素細胞的增殖；(viii)將產(chǎn)生的增殖角化細胞轉(zhuǎn)移到同樣預鋪外被層的培養(yǎng)皿上的含高鈣的無血清分化培養(yǎng)基中。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及改良的連續(xù)(無限增殖化)細胞系，特別是從正常人類皮膚組織衍生的角化細胞和黑素細胞。本發(fā)明也涉及用于分離、生產(chǎn)和保持所述改良的無限增殖化角化細胞系和黑素細胞系的新型無血清培養(yǎng)基。本發(fā)明也涉及在無血清的條件下、不加任何飼養(yǎng)細胞生產(chǎn)原代角化細胞和黑素細胞的方法。 |
| 國際公布 | WO1997/023602 英 1997.7.3 |
