| 公開(公告)號 | CN1528452A |
| 公開(公告)日 | 2004.09.15 |
| 申請(專利)號 | CN03134626.X |
| 申請日期 | 2003.09.28 |
| 專利名稱 | 惡性腫瘤廣譜基因工程納米疫苗的制備方法 |
| 主分類號 | A61K39/00 |
| 分類號 | A61K39/00;A61K39/39;A61K48/00;A61K9/127;A61K9/107;A61P35/00;C12N15/62 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學 |
| 發(fā)明(設計)人 | 隋延仿;葉菁;吳道澄;李增山;;孫玉靜;陳廣生;曲萍 |
| 地址 | 710032陜西省西安市長樂西路17號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 西安通大專利代理有限責任公司 |
| 代理人 | 李鄭建 |
| 國省代碼 | 陜西;61 |
| 主權項 | 一種惡性腫瘤廣譜基因工程納米疫苗的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：1)將腫瘤特異性抗原MAGE-1基因與生物免疫佐劑結核桿菌熱休克蛋白70(Hsp70)基因連接，構成MAGE-1～Hsp70融合基因，通過大腸桿菌進行原核表達，獲得MAGE-1～Hsp70融合蛋白；2)上述MAGE-1～Hsp70融合蛋白表達產(chǎn)物經(jīng)6M尿素變性，SephadexG-25凝膠色譜柱復性后，再通過Ni2+-NTA Agarose親和色譜和ATP-Sepherose4B親和色譜進行分離與純化，得到有活性的MAGE-1～Hsp70融合蛋白；3)將有活性的MAGE-1～Hsp70融合蛋白與超抗原葡萄球菌腸毒素A(SEA)以摩爾數(shù)比為1000∶1組合，構成復合抗原物；4)采用卵磷脂和膽固醇，通過超聲技術制備納米脂質(zhì)體，包裹復合抗原物；5)最后，通過N-羥基琥珀亞胺酯與Hsp70分子連接，形成N-Hsp70，將N-Hsp70與納米脂質(zhì)體混合，N-Hsp70插入納米脂質(zhì)體磷脂膜外層，構成惡性腫瘤廣譜基因工程納米疫苗。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種惡性腫瘤廣譜基因工程納米疫苗的制備方法，采用腫瘤特異性共有抗原基因黑色素瘤抗原-1(MAGE-1)和生物免疫佐劑熱休克蛋白70(Hsp70)基因連接，構成融合基因(MAGE-1～Hsp70)，通過大腸桿菌表達，分離與純化，獲得MAGE-1～Hsp70融合蛋白，經(jīng)變性與復性，得到高活性的融合蛋白，將此融合蛋白與超抗原葡萄球菌腸毒素A組合，構成復合抗原物。制備納米脂質(zhì)體，包裹復合抗原物，通過N-羥基琥珀酰亞胺酯與Hsp70分子連接，形成N-Hsp70，將其插入納米脂質(zhì)體磷脂膜外層，構成惡性腫瘤廣譜基因工程納米疫苗。采用本發(fā)明制備的惡性腫瘤廣譜基因工程納米疫苗具有以下優(yōu)點：1)采用皮下注射，使用簡便、安全；2)抗瘤廣譜；3)具有靶向性；4)殺瘤效果強。 |
| 國際公布 |
