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肝癌鑒別診斷用p28GANK抗體及其制備方法

公開(公告)號 CN1513876A  
公開(公告)日 2004.07.21  
申請(專利)號 CN03116825.6  
申請日期 2003.05.09  
專利名稱 肝癌鑒別診斷用p28GANK抗體及其制備方法  
主分類號 C07K16/18  
分類號 C07K16/18;C12N15/12;C12N15/63;G01N33/574  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計)人 王紅陽;傅驍勇;譚璐;劉淑琴;;吳孟超  
地址 200433上海市楊浦區(qū)翔殷路800號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海新天專利代理有限公司  
代理人 丁振英  
國省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 一種抗人p28GANK抗體的制備方法,包括如下步驟:(1)合成引物正向引物H1:5’-gcggatccagtagttgctgggacagc-3’反向引物H2:5’-cgctcgagcttgagtattaaacccagg-3’(2)用人肝癌組織總RNA逆轉(zhuǎn)錄合成單鏈DNA;(3)以上述逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板,用引物H1和H2PCR擴(kuò)增人p28GANK基因cDNA;(4)構(gòu)建p28GANK基因誘導(dǎo)表達(dá)質(zhì)粒pProex-HTb-p28GANK;(5)構(gòu)建工程菌HT-P28;(6)用工程菌HT-P28表達(dá)并純化p28GANK蛋白;(7)用p28GANK蛋白免疫家兔,使產(chǎn)生兔抗人p28GANK抗體;(8)由免疫兔血清制備兔抗人p28GANK抗體。  
摘要 本發(fā)明涉及醫(yī)療檢測試劑技術(shù)領(lǐng)域,是臨床上肝癌病理鑒別診斷中對肝細(xì)胞性肝癌進(jìn)行確認(rèn)的一種新的檢記物兔抗人p28GANK抗體。本發(fā)明p28GANK抗體能較好地識別肝細(xì)胞來源的肝細(xì)胞性或肝膽管細(xì)胞混合性肝癌,并將它們與膽管細(xì)胞性或轉(zhuǎn)移性肝癌區(qū)分開來,因此可用來制備鑒別診斷肝癌的試劑,也可與其它肝癌標(biāo)志物聯(lián)合應(yīng)用,以進(jìn)一步提高肝癌診斷的準(zhǔn)確率。  
國際公布  
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