| 公開(公告)號(hào) | CN1488761A |
| 公開(公告)日 | 2004.04.14 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN03142232.2 |
| 申請(qǐng)日期 | 2003.08.13 |
| 專利名稱 | 一類雙鏈RNA分子及其在制備抑制乙型肝炎病毒復(fù)制藥物中的應(yīng)用 |
| 主分類號(hào) | C12P19/34 |
| 分類號(hào) | C12P19/34;C12N15/70;A61K31/7088;A61P1/16;A61P31/12 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 復(fù)旦大學(xué);上海恒達(dá)科技發(fā)展股份有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 錢志康;宣寶琴;徐劍鋒;李琳 |
| 地址 | 200433上海市邯鄲路220號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 上海正旦專利代理有限公司 |
| 代理人 | 陸飛 |
| 國(guó)省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種利用大腸桿菌發(fā)酵制備用RNAi用ldsRNA和siRNA分子的方法，其特征在于包括構(gòu)建ldsRNA表達(dá)載體，并轉(zhuǎn)化大腸桿菌宿主菌，通過大規(guī)模發(fā)酵，用堿-SDS法抽提發(fā)酵菌體得到全RNA和質(zhì)粒DNA的混合物；該混合物用CF-11柱進(jìn)行純化得到ldsRNA，并利用大腸桿菌RNase III將ldsRNA切成12-30bp的siRNA。 |
| 摘要 | 本發(fā)明屬于分子生物學(xué)與生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種利用大腸桿菌發(fā)酵制備RNA干擾用雙鏈RNA分子或小干擾RNA分子的方法，并將這些RNA分子用于制備治療乙型肝炎的藥物。將本發(fā)明得到的ldsRNA或siRNA以適當(dāng)?shù)谋壤c乙型肝炎病毒表達(dá)載體混合，并用尾靜脈液壓法注射到小鼠體內(nèi)。結(jié)果顯示非同源性序列l(wèi)dsRNA和siRNA基本不抑制乙型肝炎病毒在小鼠體內(nèi)的復(fù)制，而與乙肝病毒基因同源性的ldsRNA和siRNA可以有效抑制乙型肝炎病毒在小鼠體內(nèi)的感染復(fù)制，抑制率高達(dá)90％以上。 |
| 國(guó)際公布 |
