表達(dá)為不溶性聚集體的重組蛋白質(zhì)的純化方法
|
公開(公告)號
|
CN1468255A
|
|
公開(公告)日
|
2004.01.14
|
|
申請(專利)號
|
CN01815355.0
|
|
申請日期
|
2001.08.18
|
|
專利名稱
|
表達(dá)為不溶性聚集體的重組蛋白質(zhì)的純化方法
|
|
主分類號
|
C07K1/113
|
|
分類號
|
C07K1/113;C07K1/36
|
|
分案原申請?zhí)? |
|
|
優(yōu)先權(quán)
|
2000.9.8 DE 10044360.5
|
|
申請(專利權(quán))人
|
默克專利股份公司
|
|
發(fā)明(設(shè)計)人
|
R·蘇克;O·克羅姆維爾;H·費比
|
|
地址
|
德國達(dá)姆施塔特
|
|
頒證日
|
|
|
國際申請
|
PCT/EP01/09552 2001.8.18
|
|
進(jìn)入國家日期
|
2003.03.07
|
|
專利代理機構(gòu)
|
中國專利代理(香港)有限公司
|
|
代理人
|
張元忠;孟凡宏
|
|
國省代碼
|
德國;DE
|
|
主權(quán)項
|
純化的重組蛋白質(zhì)的制備方法，該蛋白質(zhì)是可溶解的生物活性物的形式且可作為生理學(xué)介質(zhì)直接用于醫(yī)療用途，該制備源于細(xì)菌表達(dá)后的蛋白質(zhì)聚集體(“包埋體”)，后者不溶于表達(dá)介質(zhì)，該方法特點在于進(jìn)行了以下步驟：(i)將分離出的不溶性蛋白質(zhì)聚集體攝取入有機變性試劑中，(ii)將(i)所得溶液使用基本無機非緩沖的堿性含鹽洗脫液通過至少一個色譜步驟進(jìn)行純化，和(iii)將得自最終純化步驟的含有不溶的，復(fù)性的且有生物活性的蛋白質(zhì)的堿性溶液中和。
|
|
摘要
|
本發(fā)明涉及表達(dá)于細(xì)菌宿主細(xì)胞中且以不溶性聚集體形式沉淀(包埋體)的重組蛋白質(zhì)的溶解與純化方法。純化基于將所述包埋體用有機變性試劑并使用色譜法轉(zhuǎn)化為可溶形式。此處選用無機的，堿性的，含鹽的洗脫劑，其在純化完成后使重組蛋白質(zhì)在中和后可以成為能夠直接用于醫(yī)藥用途且為生理學(xué)可接受的形式。該方法特別適用于純化過敏原和過敏原片斷。
|
|
國際公布
|
WO02/20559 德 2002.3.14
|
...
