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動物乳腺內(nèi)表達表皮生長因子的重組DNA的構建方法

公開(公告)號 CN1441057A  
公開(公告)日 2003.09.10  
申請(專利)號 CN02114901.1  
申請日期 2002.02.27  
專利名稱 動物乳腺內(nèi)表達表皮生長因子的重組DNA的構建方法  
主分類號 C12N15/63  
分類號 C12N15/63;C12N15/87;C12N15/89;C12N15/12;A61K38/18;C07K14/485  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權  
申請(專利權)人 黃偉民  
發(fā)明(設計)人 黃偉民;溫漢平  
地址 510075廣東省廣州市廣州大道北542號白云區(qū)軍休所11棟602號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構  
代理人  
國省代碼 廣東;44  
主權項 一種用分子生物學技術構建重組DNA以在動物乳汁中獲得表皮生長因子的方法,其特征是將包含有動物乳蛋白基因啟動子和/或增強子的DNA片段與表皮生長因子DNA的完整或不完整片段直接或間接相連,經(jīng)過一些必要的修飾后裝入適當?shù)腄NA載體,構成重組DNA,以此重組DNA配合乳腺導管內(nèi)注射或其它建立生物反應器的方法,在乳汁中獲得活性表皮生長因子。  
摘要 本發(fā)明涉及一種用分子生物學技術在乳汁中獲得表皮生長因子的方法,克服了用現(xiàn)有技術提取或人工生產(chǎn)表皮生長因子之技術難度大、成本高、產(chǎn)量低等不足,將包含有動物乳蛋白基因啟動子和/或增強子的DNA片段與表皮生長因子DNA的完整或不完整片段直接或通過T7RNA聚合酶與T7啟動子偶連系統(tǒng)等方法間接相連,經(jīng)過一些必要的修飾后裝入適當?shù)腄NA載體,構成重組DNA,經(jīng)過克隆篩選、擴增、純化之后,與脂質體等物質混合,然后直接注入動物的乳腺導管內(nèi),讓重組DNA進入乳腺分泌細胞,或用常規(guī)的建立生物反應器的方法建立乳腺定位表達生物反應器,在分泌細胞分泌乳汁時,重組DNA得以表達,用常規(guī)的方法擠得乳汁,可從乳汁中獲重組DNA的表達產(chǎn)物——表皮生長因子,本方法具有方法簡單、成本低、表皮生長因子活性高、產(chǎn)量高等優(yōu)點。  
國際公布  
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