| 公開(公告)號 | CN1114692C |
| 公開(公告)日 | 2003.07.16 |
| 申請(專利)號 | CN97194333.8 |
| 申請日期 | 1997.03.06 |
| 專利名稱 | 擬南芥中的質體轉化 |
| 主分類號 | C12N15/00 |
| 分類號 | C12N15/00;C12N15/63 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | 1996.3.6 US 60/012,916 |
| 申請(專利權)人 | 拉杰斯大學 |
| 發(fā)明(設計)人 | P·馬利加;S·R·思克達;S·V·雷戴 |
| 地址 | 美國新澤西州 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | PCT/US97/03444 1997.3.6 |
| 進入國家日期 | 1998.11.02 |
| 專利代理機構 | 中國專利代理(香港)有限公司 |
| 代理人 | 齊曾度 |
| 國省代碼 | 美國;US |
| 主權項 | 獲得轉質體基因組的擬南芥或蕓苔植株的方法，其包括：a)在高植物生長激素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)來自擬南芥或蕓苔植株的擬南芥或蕓苔植株細胞，以刺激均一細胞分裂；b)將所述植物細胞轉至瓊脂固化培養(yǎng)基上的濾紙上；c)將轉化DNA分子傳遞到所述植物細胞的質體基因組中，所述轉化DNA分子含有：i)包含來自待轉化質體基因組的質體DNA序列的多個尋靶區(qū)段，所述尋靶區(qū)段有助于所述轉化DNA同源重組進入所述質體基因組；ii)來自質體DNA的5’端和3’端調控序列，它操作性地連接到所述尋靶區(qū)段中的選擇性標記基因上，所述調控序列有助于選擇性標記基因的表達和所編碼mRNA的穩(wěn)定，所述選擇性標記基因在植物細胞中賦予對選擇性試劑的抗性；iii)來自質體DNA的5’端和3’端調控序列，它操作性地與包含外源目的基因的編碼序列連接，從而有助于外源目的基因的表達及所編碼mRNA的穩(wěn)定；和iv)用于將所述外源基因鄰近所述選擇性標記基因插入的至少一個克隆位點，所述插入不干擾所述選擇性表型的賦予及質體側翼基因的功能；d)將在步驟(c)中轉化的細胞以高密度轉至瓊脂固化的高細胞激動素培養(yǎng)基上培養(yǎng)預定的時間，所述培養(yǎng)基含有可促進植株再生的試劑；e)將按步驟(d)處理的細胞轉至含所述再生促進試劑和選擇性試劑的瓊脂固化培養(yǎng)基中，所述轉化細胞通過所述選擇性標記基因的表達被賦予對所述選擇性試劑的抗性；并且f)選擇具有轉化的質體基因組的細胞并從中誘導植株再生。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提供獲得轉質體基因組擬南芥屬植物和蕓苔屬植物的方法與組合物。具體地說，本方法提供有助于導入外源有益DNA分子后轉化植株再生的培養(yǎng)方案和組合物。 |
| 國際公布 | WO97/32977 英 1997.9.12 |
