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中草藥的鑒別方法

公開(公告)號 CN1895289A  
公開(公告)日 2007.01.17  
申請(專利)號 CN200610016927.X  
申請日期 2006.06.07  
專利名稱 中草藥的鑒別方法  
主分類號 A61K36/00(2006.01)I  
分類號 A61K36/00(2006.01)I;G01N27/447(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 中國科學(xué)院長春應(yīng)用化學(xué)研究所  
發(fā)明(設(shè)計)人 由天艷;周曉光  
地址 130022吉林省長春市人民大街5625號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 長春科宇專利代理有限責(zé)任公司  
代理人 馬守忠  
國省代碼 吉林;22  
主權(quán)項 一種中草藥的鑒別方法,其特征在于通過毛細管電泳電化學(xué)分析方法指紋鑒別中草藥,其步驟和條件如下: 1)、分離毛細管和電極的處理 (1)毛細管處理: 毛細管在第一次使用前,通0.1mol L-1NaOH水溶液過夜,在操作過程中,為了保證分析結(jié)果的重現(xiàn)性,每次進樣間,用1-3min二次水、4-6min緩沖溶液沖洗毛細管; (2)電極的處理: 當(dāng)分析標準品溶液時,操作前將碳纖維微盤電極(CFE)超聲0.5-1.5min;每次操作前將電極超聲外,還要將電極在緩沖溶液中循環(huán)掃描10-30周(-0.2V-1.2V)進行活化; 2)、緩沖溶液的配制 pH≥9.5的磷酸鹽緩沖溶液(PBS)用1.0mol L-1NaOH調(diào)pH值,pH值<9.5的PBS緩沖溶液的配制是直接混合Na2HPO4和NaH2PO4的水溶液即可; 3)、中草藥中活性成分標準品溶液的制備及其循環(huán)伏安實驗 活性成分標準品溶液的制備: 將活性成分標準品用甲醇溶解配制成3-8mol L-1的溶液; 活性成分標準品溶液的循環(huán)伏安實驗: 將33μm CFE在含有標準品的PBS溶液中循環(huán)掃描,考察其循環(huán)伏安行為; 4)、檢測條件的優(yōu)化,并在此優(yōu)化條件下進行重現(xiàn)性、檢測限和線性范圍的考察 檢測條件的優(yōu)化: 在1.0-1.3V間變化檢測電位、5-50mmol L-1間變化緩沖溶液濃度、7-11間變化緩沖溶液pH值、5-40s間變化進樣時間和5-22.5kV間變化分離電壓考察對峰電流、遷移時間、分離度和分離效率的影響; 5)、中草藥樣品溶液的制備 用帶有20-80目篩子的植物粉碎機粉碎草藥樣品,稱取0.3-0.8g的草藥樣品用甲醇浸泡10-18h,然后水浴超聲30-60min,之后2000-3500rpm離心5-10min,此萃取過程再重復(fù)1-3次,最后,萃取液定容于5-10mL的甲醇中;進樣前,所有的樣品溶液均用0.22μm的纖維素酯膜過濾并稀釋到所需要的濃度進行分析; 6)、中草藥CE-ED指紋圖譜的獲得 中草藥CE-ED指紋圖譜的獲得是在步驟4)中所獲得的最佳條件下進行電泳分析得到的; 7)、對比標準混合溶液和實際樣品中活性成分的峰高確定實際樣品中活性成分的含量; 8)、對比所獲得的CE-ED指紋圖譜,分別從幾個不同的指紋片段鑒別同種植物的不同部位以及不同種植物,從而鑒別中草藥及其混淆品。  
摘要 本發(fā)明涉及一種中草藥的鑒別方法,其特征在于通過毛細管電泳電化學(xué)分析方法指紋鑒別中草藥。步驟為:配制緩沖溶液;進行中草藥中活性成分標準品溶液的配制及其循環(huán)伏安實驗;對檢測條件進行優(yōu)化,并在此優(yōu)化條件下進行重現(xiàn)性、檢測限和線性范圍考察;中草藥樣品溶液的制備;中草藥CE-ED指紋圖譜的獲得;通過對比標準混合溶液和實際樣品中活性成分的峰高確定實際樣品中活性成分的含量;通過對比活性成分的含量及所獲得的CE-ED指紋圖譜,鑒別中草藥。本發(fā)明能夠建立中草藥的標準CE-ED指紋圖譜,同時進行活性成分的定量檢測,具有高的分離效率、低的檢測限、成本低、重現(xiàn)性好等優(yōu)點,是控制及評價中草藥質(zhì)量的先進方法。  
國際公布  
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