公開(公告)號
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CN101020066A
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公開(公告)日
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2007.08.22
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申請(專利)號
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CN200710013248.1
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申請日期
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2007.01.19
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專利名稱
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一種原位移植構(gòu)建人類肝癌小鼠模型的方法
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主分類號
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A61K49/00(2006.01)I
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分類號
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A61K49/00(2006.01)I;C12N5/08(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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山東大學
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發(fā)明(設(shè)計)人
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白增亮;王 澤;張敬平
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地址
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250061山東省濟南市歷下區(qū)經(jīng)十路73號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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濟南金迪知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
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代理人
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王緒銀
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國省代碼
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山東;37
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主權(quán)項
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一種原位移植構(gòu)建人類肝癌小鼠模型的方法,步驟是: [1]人肝癌細胞株的培養(yǎng):選人肝癌細胞株常規(guī)傳代培養(yǎng),備用; [2]熒光染料DiI標記的人肝癌細胞懸液的制備:選取上述對數(shù)生長期的人肝癌細胞株之一,與20μg/ml活體熒光染料DiI在37℃~38℃下共孵30min~60min,之后,0.25%無菌胰蛋白酶消化,以基本培養(yǎng)液收集細胞并調(diào)整細胞懸液濃度至0.5×106個/ml~1.0×109個/ml; [3]原位移植構(gòu)建人類肝癌小鼠模型:選用昆明種三日齡乳鼠,腹部皮膚消毒后,利用無菌30-gauge50-μl玻璃微量進樣器,將10μl~50μl上述DiI標記的人肝癌細胞懸液,直接移植入乳鼠肝葉內(nèi),建立人肝癌小鼠原位移植性模型; [4]模型鑒定。
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摘要
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本發(fā)明公開了一種原位移植構(gòu)建人類肝癌小鼠模型的方法,即利用具有正常免疫功能的昆明種乳鼠作為荷瘤受體,于小鼠體外向鼠肝葉內(nèi)直接注射人肝癌細胞懸液,建立人肝癌細胞原位移植性荷瘤模型。本發(fā)明方法實施簡單,成功率高,基于本發(fā)明,可以在小鼠正常的機體免疫環(huán)境下,實時監(jiān)測肝癌細胞與小鼠免疫系統(tǒng)的相互作用,能夠非常真實地模擬人類體內(nèi)免疫耐受及抗腫瘤免疫的全過程,為免疫生物學藥物的篩選及藥理的研究提供更為理想的操作平臺。
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國際公布
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