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扶正化瘀植物藥中丹參原料指紋圖譜質(zhì)量控制方法

公開(kāi)(公告)號(hào) CN101040907A  
公開(kāi)(公告)日 2007.09.26  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200710040141.6  
申請(qǐng)日期 2007.04.27  
專利名稱 扶正化瘀植物藥中丹參原料指紋圖譜質(zhì)量控制方法  
主分類號(hào) A61K36/537(2006.01)I  
分類號(hào) A61K36/537(2006.01)I;A61P9/10(2006.01)I;A61P15/00(2006.01)I;G01N30/02(2006.01)I;G01N33/86(2006.01)I;A01G1/00(2006.01)I;A61K31/125(2006.01)N  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 上,F(xiàn)代中醫(yī)藥技術(shù)發(fā)展有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 胡 坪;潘一峰  
地址 200051上海市長(zhǎng)寧區(qū)天山路600弄4號(hào)7F-C  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海泰能知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所  
代理人 黃志達(dá);謝文凱  
國(guó)省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 一種扶正化瘀植物藥中丹參原料指紋圖譜質(zhì)量控制方法,包括下列步驟: (1)提取丹參 稱取1.0g丹參粉末,加入100ml50%的甲醇,精密稱定重量,微波提取40-70分鐘,冷卻補(bǔ)重。搖勻,用0.23-0.45μm微孔濾膜過(guò)濾,取續(xù)濾液進(jìn)行HPLC指紋圖譜分析; (2)梯度洗脫流動(dòng)相 AlltimaC18柱(4.6mm×250mm,5μm),檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm,流速為1.0ml/min,柱溫20-40℃;進(jìn)樣量為10-20μl。采用梯度洗提方式洗脫樣品,流動(dòng)相及梯度設(shè)置如表所示:

時(shí)間(min)

A(0.4%甲酸)/%

B(乙腈)/%

0405070

90631815

10378285

(3)標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的建立 選取了7個(gè)特征峰,分別為1號(hào)峰丹參素、8號(hào)峰迷迭香酸、9號(hào)峰紫草酸、10號(hào)峰丹酚酸B、11號(hào)峰丹酚酸B異構(gòu)體、14號(hào)峰隱丹參酮和14號(hào)峰丹參酮IIA,其中丹參素、丹酚酸B和丹參酮IIA為主要活性成分; 優(yōu)先考慮確定療效的藥材的指紋圖譜。優(yōu)先考慮含量在平均值附近的樣品的指紋圖譜,結(jié)合指紋圖譜和定量結(jié)果,選取特征峰分離較好,峰的保留時(shí)間和峰高適宜、峰型較典型的指紋圖譜,優(yōu)先選取基線平穩(wěn)、信噪比好的指紋圖譜; (4)指紋圖譜的質(zhì)量控制 a.樣品真?zhèn)蔚蔫b別 水溶性酚酸以丹酚酸B為指標(biāo)峰,酯溶性二萜以丹參酮IIA為指標(biāo)峰,丹參素0.21,迷迭香酸0.91,紫草酸0.93,丹酚酸B1.00,丹酚酸B/E異構(gòu)體1.04,隱丹參酮0.92,丹參酮IIA1.00; b.樣品質(zhì)量評(píng)價(jià) 將樣品的HPLC指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜比較,以16個(gè)共有峰計(jì)算得到的相似度應(yīng)不得小于0.9。  
摘要 本發(fā)明涉及扶正化瘀植物藥中丹參原料指紋圖譜質(zhì)量控制方法,包括:(1)取1.0g丹參粉末,加入甲醇微波提。(2)梯度洗脫流動(dòng)相:Alltima C18柱(4.6mm 250mm,5μm),檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm,流速為1.0ml/min,柱溫20-40℃;進(jìn)樣量10-20ul;(3)建立標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜:1號(hào)峰丹參素、8號(hào)峰迷迭香酸、9號(hào)峰紫草酸、10號(hào)峰丹酚酸B、11號(hào)峰丹酚酸B異構(gòu)體、14號(hào)峰隱丹參酮和14號(hào)峰丹參酮IIA;(4)指紋圖譜的質(zhì)量控制:鑒別峰相對(duì)保留時(shí)間,丹參素0.21,迷迭香酸0.91,紫草酸0.93,丹酚酸B 1.00,丹酚酸B/E異構(gòu)體1.04,隱丹參酮0.92,丹參酮IIA 1.00;(5)丹參種植采收方法;本發(fā)明能全面控制原料的質(zhì)量,確保產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定。  
國(guó)際公布  
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