| 公開(公告)號 | CN1325651C |
| 公開(公告)日 | 2007.07.11 |
| 申請(專利)號 | CN01112983.2 |
| 申請日期 | 2001.05.24 |
| 專利名稱 | 人重組乙型干擾素的高效表達及其應用 |
| 主分類號 | C12N15/63(2006.01)I |
| 分類號 | C12N15/63(2006.01)I;C12N15/67(2006.01)I;C12N15/20(2006.01)I;A61P29/00(2006.01)I;A61P19/02(2006.01)I;A61P17/06(2006.01)I;A61P3/10(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;A61P1/16(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 大連金威基因技術有限公司 |
| 發(fā)明(設計)人 | 秦 瑩 |
| 地址 | 116001遼寧省大連市民意街40號海景花園大廈25樓 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 上海東亞專利商標代理有限公司 |
| 代理人 | 董 梅 |
| 國省代碼 | 遼寧;21 |
| 主權項 | 一種高效表達人重組乙型干擾素的方法，其特征在于：通過真核細胞表達載體來轉化宿主細胞，使之生產重組人乙型干擾素，真核細胞表達載體是昆蟲桿狀病毒表達載體或酵母菌表達載體中的一種，其中： 所述真核細胞表達載體是昆蟲桿狀病毒表達載體時，所述宿主細胞是昆蟲細胞，克隆的人乙型干擾素通過去除天然的疏水性信號肽序列，代之以新的桿狀病毒信號肽來進行修飾，這些嵌合基因被引入桿狀病毒表達載體后，桿狀病毒多角體蛋白啟動子指導被感染的昆蟲細胞中重組乙型干擾素蛋白的表達，而由18個氨基酸組成的桿狀病毒信號肽僅指導人乙型干擾素的翻譯進入昆蟲細胞的糖基化途徑，其本身并不出現(xiàn)在成熟的人乙型干擾素糖蛋白上； 所述真核細胞表達載體是酵母菌表達載體時，所述宿主細胞是酵母菌，克隆的人乙型干擾素通過去除天然的疏水性信號肽序列，代之以新的分泌型酵母菌信號肽來進行修飾，這些嵌合基因被引入酵母菌表達載體后，被轉化到酵母菌中發(fā)酵，同時生產重組人乙型干擾素，分泌型酵母菌信號肽指導乙型干擾素的翻譯進入酵母細胞的糖基化途徑，并分泌至培養(yǎng)上清中，其本身并不出現(xiàn)在成熟的人乙型干擾素糖蛋白上。 |
| 摘要 | 本發(fā)明人重組乙型干擾素的高效表達及其應用涉及采用生物基因工程的方法在真核細胞系統(tǒng)中表達重組人乙型干擾素，以及重組人乙型干擾素的用途。本發(fā)明人重組乙型干擾素的高效表達系通過真核細胞表達載體來轉化宿主細胞，使之生產重組人乙型干擾素，所述真核細胞表達載體是昆蟲桿狀病毒表達載體時，所述宿主細胞是昆蟲細胞；所述真核細胞表達載體是酵母菌表達載體時，所述宿主細胞是酵母菌。本發(fā)明利用具有糖基化功能的昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)和酵母菌表達系統(tǒng)來表達人乙型干擾素基因，所表達和生產的蛋白量相對量大、純度高。本發(fā)明中所描述的表達高產量重組人乙型干擾素的方法可以使臨床應用所需要的重組蛋白藥物的制備簡單化和廉價化。 |
| 國際公布 |
