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重組人His-TT-B7-H1IgV腫瘤疫苗及其制備方法

公開(公告)號(hào) CN101002937A  
公開(公告)日 2007.07.25  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200610105039.5  
申請(qǐng)日期 2006.08.23  
專利名稱 重組人His-TT-B7-H1IgV腫瘤疫苗及其制備方法  
主分類號(hào) A61K39/395(2006.01)I  
分類號(hào) A61K39/395(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 張英起;王偉華;韓 葦;李 萌;薛曉暢;孟潔如;包春杰;郝 強(qiáng);李維娜;王增祿  
地址 710032陜西省西安市長(zhǎng)樂西路17號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 西安通大專利代理有限責(zé)任公司  
代理人 李鄭建  
國(guó)省代碼 陜西;61  
主權(quán)項(xiàng) 一種重組人His-TT-B7-H1IgV腫瘤疫苗,其特征在于,利用人工合成的方法獲得TT830-843-B7-H1IgV區(qū)基因片段,在上游引入BamHI酶切位點(diǎn),下游引入SalI酶切位點(diǎn),將其插入pQE-30原核表達(dá)載體,轉(zhuǎn)化大腸桿菌,在大腸桿菌中獲得高效表達(dá),經(jīng)純化后得到rhHis-TT-B7-H1IgV蛋白,在體外能夠競(jìng)爭(zhēng)性抑制B7-H1/Fc蛋白與抗B7-H1單抗的結(jié)合; 其TT830-843-B7-H1IgV區(qū)的氨基酸序列為: Gln Tyr Ile Lys Ala Asn Ser Lys Phe Ile Gly Ile Thr Glu Ala Ala Ala Glu Phe Asp Leu Tyr Val Val Glu Tyr Gly Ser Asn Met Thr Ile Glu Cys Lys Phe Pro Val Glu Lys Gln Leu Asp Leu AlaAla Leu Ile Val Tyr Trp Glu Met Glu Asp Lys Asn Ile Ile Gln Phe Val His Gly Glu Glu Asp Leu Lys Val Gln His Ser Ser Tyr Arg Gln Arg Ala Arg Leu Leu Lys Asp Gln Leu Ser Leu Gly Asn Ala Ala Leu Gln Ile Thr Asp Val Lys Leu Gln Asp Ala Gly Val Tyr Arg Cys Met Ile Ser Tyr Gly Gly Ala Asp Tyr Lys Arg Ile Thr Val Lys Val Asn。  
摘要 本發(fā)明公開了一種重組人His-TT-B7-H1IgV腫瘤疫苗,利用人工合成的方法獲得TT830-843-B7-H1IgV區(qū)基因片段,將其插入pQE-30原核表達(dá)載體,轉(zhuǎn)化大腸桿菌。在大腸桿菌中獲得高效表達(dá),經(jīng)純化后得到His-TT-B7-H1IgV蛋白,本發(fā)明的重組人His-TT-B7-H1IgV蛋白通過免疫小鼠產(chǎn)生抗B7-H1抗體,并且該抗血清能夠在體外依賴補(bǔ)體殺傷表達(dá)B7-H1的腫瘤細(xì)胞。應(yīng)用該蛋白免疫小鼠不僅可對(duì)荷瘤小鼠體內(nèi)SP2/0腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)起到一定的抑制作用,同時(shí)還可延長(zhǎng)荷瘤小鼠的生存期。從而有可能為腫瘤的免疫治療提供一種新的蛋白質(zhì)藥物。該腫瘤疫苗的應(yīng)用目的在于以B7-H1為靶點(diǎn)獲得一種能夠促使小鼠體內(nèi)產(chǎn)生針對(duì)B7-H1分子的中和抗體的腫瘤疫苗,從而研究應(yīng)用主動(dòng)免疫的方法進(jìn)行腫瘤的免疫治療。  
國(guó)際公布  
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