公開(公告)號 | CN100345971C |
公開(公告)日 | 2007.10.31 |
申請(專利)號 | CN03141577.6 |
申請日期 | 2003.07.14 |
專利名稱 | 重組人干細胞因子的原核表達載體、工程菌及制備方法 |
主分類號 | C12N15/70(2006.01)I |
分類號 | C12N15/70(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K14/715(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權 | |
申請(專利權)人 | 第二軍醫(yī)大學免疫學研究所 |
發(fā)明(設計)人 | 陳國友;蔣應明;黃 欣;張 意;盧 琳;施群英;曹雪濤 |
地址 | 200433上海市楊浦區(qū)翔殷路800號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構 | 上海專利商標事務所有限公司 |
代理人 | 徐 迅 |
國省代碼 | 上海;31 |
主權項 | 一種用于重組表達人干細胞因子的原核表達載體,其特征在于,所述的載體含有人干細胞因子表達盒以及與所述表達盒操作性相連的啟動子,所述的表達盒從5’至3’依次具有:序列為TTAACTTTA的增強子、長度為14±2bp的上游間隔序列、和人干細胞因子的編碼序列、終止密碼子; 其中所述的上游間隔序列具有SEQIDNO:7中第10-23位的序列。 |
摘要 | 本發(fā)明涉及高效表達重組人干細胞因子(rhSCF)的表達載體、工程菌及制備方法。本發(fā)明還提供了通過優(yōu)選的培養(yǎng)基成分及優(yōu)化發(fā)酵參數(shù),建立了工程菌高密度發(fā)酵方法。還提供了通過包涵體變性、蛋白復性、色譜分離制備高純度重組人干細胞因子的方法。本發(fā)明中構建的重組人干細胞因子表達工程菌具有表達量高,表達穩(wěn)定等優(yōu)點,所采取的純化工藝穩(wěn)定可靠,得率高,利于大規(guī)模生產(chǎn)。 |
國際公布 |