| 公開(公告)號 | CN101100655A |
| 公開(公告)日 | 2008.01.09 |
| 申請(專利)號 | CN200710042044.0 |
| 申請日期 | 2007.06.15 |
| 專利名稱 | 胚胎源性多能干細(xì)胞向心臟起搏細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化的方法 |
| 主分類號 | C12N5/06(2006.01)I |
| 分類號 | C12N5/06(2006.01)I;C12N5/08(2006.01)N |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 張 喜;張傳森 |
| 地址 | 200433上海市翔殷路800號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 上海德昭知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 |
| 代理人 | 丁振英 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種胚胎源性多能干細(xì)胞向心臟起搏細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化的方法，其特征在于該方法包括： I.胚胎源性多能干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)、鑒定 采用全骨髓直接貼壁法獲得原代培養(yǎng)的細(xì)胞，然后按有限稀釋法進(jìn)行克隆培養(yǎng)獲得該細(xì)胞的純化系，通過對CD133、SSEA-1、CD45、Oct-4和Nanog標(biāo)記物的檢測進(jìn)行鑒定； II.胚胎源性多能干細(xì)胞向心臟起博細(xì)胞的誘導(dǎo)分化 向胚胎源性多能干細(xì)胞施加旁分泌因子、胞外基質(zhì)組分層粘連蛋白、纖維連接蛋白，誘導(dǎo)胚胎源性多能干細(xì)胞分化為心臟起搏細(xì)胞。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及干細(xì)胞誘導(dǎo)分化技術(shù)領(lǐng)域。目前構(gòu)建生物心臟起搏器的細(xì)胞移植方法主要是以胚胎源性干/祖細(xì)胞和成體間充質(zhì)干細(xì)胞作為細(xì)胞來源。本發(fā)明利用胚胎源性多能干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化心臟起搏細(xì)胞，采用全骨髓直接貼壁法獲得原代培養(yǎng)的細(xì)胞，按有限稀釋法進(jìn)行克隆培養(yǎng)獲得該細(xì)胞的純化系，通過施加旁分泌因子內(nèi)皮素-1或神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白-1，胞外基質(zhì)組分層粘連蛋白、纖維連接蛋白等基質(zhì)膠；同時轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)起搏基因HCN4的方法體外誘導(dǎo)胚胎源性多能干細(xì)胞向起搏細(xì)胞方向分化。本發(fā)明提供一種供給廣泛、無免疫原性、不涉及倫理學(xué)問題的起搏細(xì)胞來源，為臨床治療病態(tài)竇房結(jié)綜合癥等緩慢性心率失常帶來希望。 |
| 國際公布 |
