豬支原體性肺炎是對養(yǎng)豬業(yè)造成重大經(jīng)濟(jì)損失，最常發(fā)生、流行最廣、是非常難治愈的重要疫病之一。是由豬肺炎支原體引發(fā)的一種慢性肺炎，也叫做豬地方流行性肺炎。但近年來由于經(jīng)常圓環(huán)病毒等其它病原混合感染，給飼主造成重大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，飼養(yǎng)http://bhskgw.cn/shouyi/yu/jiage/過程中要對豬支原體肺炎正確診斷、檢測，及早防治是非常重要的。目前用于MPS的血清學(xué)試驗(yàn)有放射免疫擴(kuò)散測定、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、間接血凝試驗(yàn)、凝集試驗(yàn)以及酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等等，其中用間接血凝試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)更為理想。
血清學(xué)抗體檢測技術(shù)診豬支原體肺炎
1、檢測豬支原體肺炎間接血凝試驗(yàn)
間接血凝試驗(yàn)(IHA)具有一定的特異性和敏感性，是診斷豬支原體肺炎的常用方法之一。Dowdle等首先用IHA檢測Mhp抗體，但被感染豬的血清能使綿羊紅細(xì)胞自然溶血。Lam等用豬紅細(xì)胞代替綿羊紅細(xì)胞，固然其效價(jià)比用綿羊紅細(xì)胞低，但在試驗(yàn)中不易發(fā)生溶血現(xiàn)象。由于血清中含有特異吸附因子易溶血，制備的紅細(xì)胞存在個(gè)體差異不易標(biāo)準(zhǔn)化，其試驗(yàn)也不易操縱，使得IHA在臨床應(yīng)用中受到了一定的限制。
2、檢測豬支原體肺炎補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)
補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CFT)也是檢測豬血清中Mhp抗體的有效試驗(yàn)之一，包括微管補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)和微量修正補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)。補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)在實(shí)驗(yàn)接種豬和自然感染豬中，CFT陽性率與豬肺部病變有較好的相關(guān)性，但仍存在著很高的假陽性和假陰性。Lloyd等以為，假陰性是由于循環(huán)抗原的影響，而假陽性是由于感染了其他支原體出現(xiàn)交叉反應(yīng)或是由于沒產(chǎn)生或發(fā)現(xiàn)病變。CFF不能確定4―9周齡豬的感染狀況。CFT在敏感性和特異性方面存在一定的局限性，但假如綜合運(yùn)用臨診和病理顯微檢查，CFT還是確定Mhp感染狀況的有效手段之一。
3、檢測豬支原體肺炎酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)是目前國內(nèi)外最常用于診斷Mhp的方法之一，具有能進(jìn)行定量分析、敏感性高、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)。Bmggmann等首次報(bào)道以SDS提取物作抗原，用間接ELISA檢測Mhp抗體的敏感性高，但易與絮狀支原體和豬鼻支原體發(fā)生非特異性交叉反應(yīng)。Nicolet等改用Tween20提取物作抗原，用間接ELISA檢測Mhp抗體，結(jié)果比用支原體全菌和SDS溶解物作抗原有更高的特異性，但與絮狀支原體也存在部分交叉反應(yīng)。Bereiter等用改進(jìn)的Tween20 ELISA降低了因絮狀支原體感染引起的交叉反應(yīng)。Fut0克隆了Mhp的46ku表面抗原(p46)基因，誘變后在E coli中表達(dá)，用提純的重組P46蛋白作抗原用于ELISA診斷，結(jié)果發(fā)現(xiàn)與其他豬支原體無交叉反應(yīng)。Feld等建立了一種單克隆抗體阻斷ELISA，此法可從單個(gè)抗原決定簇上檢測Mhp抗體，而且不需完全純化抗原。隨后，Potier等建立了一種用Mhp特有的40ku膜蛋白作抗原的單克隆抗體阻斷ELISA，用此法檢測接種了豬鼻支原體和絮狀支原體的SPF豬和感染Mhp豬的血清，發(fā)現(xiàn)Mhp與絮狀支原體和豬鼻支原體無交叉反應(yīng)。Eun Jin
Jang等(2007)將黏附因子P97在E. coli中表達(dá)，使豬肺炎支原體裂解成6個(gè)片斷，采用其中的50 KDa的蛋白做為抗原做ELISA，結(jié)果發(fā)現(xiàn)特異性很強(qiáng)。在國內(nèi)，劉茂軍等(2007)選用豬肺炎支原體Mhp J株全菌膜蛋白作為包被抗原，建立檢測豬肺炎支原體抗體的間接ELISA檢測方法，結(jié)果顯示此方法靈敏度很高。
4、檢測豬支原體肺炎表面細(xì)胞質(zhì)基因組共振實(shí)驗(yàn)
Kim TJ(2006)利用P97粘附因子中的分子量為30 KDa的蛋白為抗原建立了檢測豬肺炎支原體抗體滴度的表面細(xì)胞質(zhì)基因組共振實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)和傳統(tǒng)ELISA方法同時(shí)檢測了來自6個(gè)豬場的70份血清，結(jié)果顯示表面細(xì)胞質(zhì)基因組共振實(shí)驗(yàn)具有很高的特異性和敏感性，而且兩種方法有正相關(guān)性。
通過上述：
掌握了血清學(xué)檢測豬支原體肺炎的綜合技術(shù)。另外，更多相關(guān)的文章和技術(shù)指導(dǎo)請登錄畜牧獸醫(yī)網(wǎng)了解。
